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        请问26147试剂盒为什么洗不掉重链呀?频率还比较高

        相关实验:免疫共沉淀(Co-IP)

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        实验室小助理夏奇

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        3 个回答

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        土井挞克树

        有帮助

        重链洗不掉可能是交联作用太强了,可以加用裂解液增强洗脱

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        loveliufudan

        有帮助

        26147 抗体亲和纯化试剂盒是一种可用于快速纯化含有Flag 标签的蛋白质的试剂盒。对于抗体洗不掉重链的情况,可能是以下几个原因导致的:

        存在非特异性结合:如果存在非特异性结合,那么可能会导致抗体无法被完全洗脱。这可能是由于洗涤缓冲液的浓度不够高,洗涤的时间不够长,或者温度不够高等原因导致的。

        存在交联:在进行蛋白质亲和纯化的过程中,如果存在过度交联,那么可能会导致抗体与其他蛋白质交联在一起,难以被完全洗脱。这可能是由于交联剂使用过多或者交联时间过长等原因导致的。

        存在多余的抗体:在进行蛋白质亲和纯化的过程中,如果使用了过多的抗体,那么可能会导致抗体无法被完全洗脱。这可能是由于抗体浓度过高等原因导致的。

        user-title

        赛默飞世尔科技

        有帮助

        这和您使用的二抗有关,如果当使用常规的 Anti-IgG (H+L) 酶标二抗时,通常会出现对应免疫沉淀一抗变性后产生的重链(55kDa)和轻链(25kDa)两条带。如果检测的目的蛋白分子量在此附近时,就会受到这两条带的干扰。此外交联时要注意有关的溶液中不能有自由氨基存在

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