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coip结果分析-救救孩子吧!!!

相关实验:免疫共沉淀(Co-IP)

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lagrimaOI9K

用A蛋白抗体(分子量110)拉的B蛋白(19)。


目前WB结果B有条带,A在110无条带,但是在60多有浅浅的条带。


这种结果有意义吗?有大佬知道为啥会这样吗?




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5 个回答

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是TTT

有帮助
  1. 这种结果没有意义
  2. 60的位置可能是重链,110没有条带你需要排除以下原因:一.跑input排除蛋白没有降解。二.确认A抗体说明书可以用来做co-ip。三.co-ip全程需要冰上或者4℃。四.co-ip完成以后,蛋白洗脱步骤是否无误。五.co-ip实验除了需要有实验组,还应该设置对照组,对照组应为同种属的iGg抗体去拉

 

 

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来一起探讨

有帮助

在实验前确定目标蛋白是否是二聚体或多聚体,若是二聚体则可能会出现该情况,或是使用的凝胶浓度与蛋白的大小不适,导致蛋白跑不开,还有可能是目的蛋白存在翻译后修饰等情况。

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z流沙z

有帮助

因为IP的A蛋白,所以A蛋白应该是很浓的条带,不是60多浅浅的一条。可能是蛋白大小差的比较多,转膜条件需要优化一下。

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土井挞克树

有帮助

没什么意义,降解的可能性大,建议重新做

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balalaLy

有帮助

60多的条带有没有可能是重链?或者是这个蛋白的亚基?

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