WB只能跑出来内参没有目的条带 求助

1. 裁膜的位置是否得当，有时候存在修饰，蛋白条带可能与理论存在一点差异，裁膜位置需上下多裁一些
2. 目的条带是否表达，不同细胞不同蛋白的表达量存在差异，发光时不同的细胞条带需剪开
3. 一抗二抗种属需确保一致

这种情况一般可能考虑抗体种属的问题，确认一下一抗二抗的种属正确

有内参有证明蛋白样品没问题。没有目的带可能是目的蛋白的表达量很低，或是选用的抗体的有问题，可以用阳性对照做一次进行对比

很正常。内参有证明蛋白样品没问题。没有目的带原因很多。比如目的蛋白是否表达量很低，因为内参表达是很高的。

可能就是抗体未能识别出目的蛋白，故未能做出目的条带，也有可能是组分内的目的蛋白总量太少，未能达到检出限。

如果其它条件都没有变的话，可以找找是不是tbst或者抗体稀释液的问题。这些buffer的ph最好是在7.5左右，太高的话会影响抗原抗体结合