我跑出来的Co-IP，为什么IgG有很浓的条带

igG条带很浓可能是样品被蛋白酶降解导致的，建议添加蛋白酶抑制剂,且所有操作保持4℃以下冰上操作并防止冻融。

在 Co-IP 实验中，IgG 通常用作阴性对照抗体，用于检测非特异性结合。在理想情况下，IgG 不应该与任何目标蛋白结合，因此在 Western blot 或其他检测方法中，IgG 应该没有条带或者只有非常弱的条带。

但是在某些情况下，IgG 可能会出现很浓的条带，这可能是由于以下原因：

IgG 与非特异性的蛋白质结合：在 Co-IP 实验中，IgG 可能会与非特异性的蛋白质结合，并在 Western blot 或其他检测方法中出现条带。这可能是由于洗涤步骤不充分、抗体浓度过高或其他实验条件不合适等原因导致。

IgG 与目标蛋白结合：IgG 有时也可能会与目标蛋白结合，尤其是当实验条件没有经过充分优化时。这可能导致在 Western blot 或其他检测方法中观察到类似目标蛋白的条带。

特定的细胞或组织中存在高水平的IgG：在某些细胞或组织中，可能存在高水平的内源性IgG，这些内源性IgG可能与实验中使用的外源性IgG结合，导致在 Western blot 或其他检测方法中出现条带。

综上所述，在 Co-IP 实验中，IgG 出现浓条带的原因可能有多种，需要根据实验具体情况进行分析。如果出现浓条带的问题，可以优化实验条件，例如增加洗涤次数、调整抗体浓度、更换洗涤缓冲液等，以提高实验的特异性。同时，在进行 Co-IP 实验时，也需要选择合适的阴性对照抗体，并对实验结果进行仔细的解释和分析。

这和您使用的二抗有关，如果当使用常规的 Anti-IgG (H+L) 酶标二抗时，通常会出现对应免疫沉淀一抗变性后产生的重链（50kDa）和轻链（25kDa）两条带。如果检测的目的蛋白分子量在此附近时，就会受到这两条带的干扰。