实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问足够量的细胞为什么获取的RNA沉淀很少呢？

土井挞克树

可能是细胞裂解的时候不充分,严重影响产量，建议增加裂解时间，必要时更换裂解酶种类

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问制备的脂质体超滤滤不下来，有什么解决方法吗？

土井挞克树

可以试一试低吸附的超滤管，滤过效果好一些。

3 回答1073 围观

问大鼠灌胃后，弄成湿罗音了咋办

土井挞克树

考虑是一次灌胃的液体量太大了，可以减少灌胃的液体量

3 回答931 围观

问有序logistic回归的问题

Dr_劉医生

先剔除再放入有序logistic回归，单因素没有意义的话，多因素模型调整的话不会有阳性结果的。

3 回答417 围观

问求助:请问这个数据有没有问题呀？

Dr_劉医生

b值指的是效应值β吧，可以是正负，同理，OR值也可以大于1或者小于1，具体看HB和ALB与因变量Y的关系是正相关还是负相关。正相关：β为正，OR＞1；负相关：β为负，OR＜1。

3 回答396 围观

问问问Rct 和真实世界研究最本质的区别有哪些呢？最好能遇到大神用大白话传授一下经验

Dr_劉医生

最大的区别就是RCT是在受试者中干预，预测未来发生的事件的概率。真实世界研究是既往已经干预了，并且发生了事件的患者，进行统计分析来验证干预和事件的关系。

4 回答2193 围观

问nhanes数据库里死亡率cox比例风险模型和log-rank相矛盾

Dr_劉医生

正常现象，算法不同。COX回归是半参数法，K-M法（Log rank，时序检验）是非参数法。而众所周知，在符合条件的情况下，参数检验的检验效力要高于非参数检验。

3 回答1080 围观

问网状meta分析:看不懂联赛图、不懂两两比较直接p值怎么求

土井挞克树

可以导出p值的方法：1. 使用统计软件：可以使用统计软件，如SPSS，Stata，R等，来计算网状状meta列联表的p值。2. 使用Excel：可以使用Excel的函数，如CHISQ.TEST，来计算网状状meta列联表的p值。3. 使用其他统计软件：可以使用其他统计软件，如SAS，Minitab，Epi Info等，来计算网状状meta列联表的p值。

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问WB胶原指标跑不出来

sswei

样品浓度太低，建议将样品缓冲液冻干一部分，或者以超滤等方法，提高目的蛋白的浓度后，在进行电泳。

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问wb条带分析|蛋白跑出泳道；条带显示不全

loveliufudan

电泳不均匀或者样品加载不均匀导致蛋白质跑出了浓缩胶范围，同时转膜也存在不均匀的问题，导致某些条带显示不完整或者缺失。此外，实验中也可能存在其他因素，如抗体浓度、蛋白质含量等问题，也有可能影响结果。

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问求助OX-LDL与LDL比较其电泳迁移率

loveliufudan

OX-LDL和LDL的电泳迁移率可能存在一定差异，因为OX-LDL经氧化后，脂质双层发生了结构改变，导致其电荷密度和分子大小发生变化，从而影响了其电泳迁移率。因此，建议您尝试调整电泳条件，优化实验流程，以更好地分离和检测LDL和OX-LDL。以下是一些可能有帮助的建议：优化琼脂糖凝胶浓度：您可以尝试增加琼脂糖凝胶的浓度，以提高分离效果和条带清晰度。一般情况下，0.8%的琼脂糖凝胶电泳可以分离LDL

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问请教一下

loveliufudan

Tris-EDTA-Mg缓冲液通常用于DNA的保存和纯化等实验中，常用的配方为Tris-HCl 10 mM、EDTA 1 mM和MgCl2 10 mM。具体的配制方法如下：称取所需量的Tris base（Tris-HCl的原料）和EDTA，加入去离子水中，调整pH至8.0。加入所需量的MgCl2。加入去离子水至最终体积，混合均匀即可。需要注意的是，Tris-HCl的pH会随温度的变化而变化，因此在

2 回答649 围观

问基因检测

sswei

ABC转运蛋白在许多组织中广泛表达，如肠道、肝脏、肾脏、血脑屏障、血睾丸屏障、胎盘和外周血细胞等，特别是淋巴细胞，所以可以检测。

3 回答530 围观

问药物作用后基因表达上调?

loveliufudan

抗菌药物作用后，有些细菌可能会通过一系列的适应性响应机制来对抗药物的攻击。这些适应性响应机制可以包括细胞壁重建、毒力基因表达和自由基清除等。在这种情况下，可能会观察到一些细菌毒力基因的上调。这是因为毒力基因编码了一些蛋白质，这些蛋白质可以协助细菌逃避宿主的免疫防御，并在感染过程中对宿主细胞造成损伤。在抗菌药物的压力下，一些细菌可能会增加毒力基因的表达，以提高其对宿主的侵袭能力，从而更好地逃避宿主免

3 回答888 围观

问请问诱导成功的贴壁脂肪细胞，取出一部分使用后，剩余的细胞怎么保存啊？重新种回去细胞也不会再贴壁了，冻存可以吗？冻存条件呢？

来一起探讨

可以将近剩余细胞进行接着培养，也可以进行冻存，冻存时，注意DMSO与血清的比例，1/9，或是DMSO，血清，培养基比例为1/2/7，-80℃可短期冻存，若要进行长期冻存可保存在液氮罐中。

6 回答343 围观

问有哪位大佬可以让我加下联系方式嘛？我想请求下盆腔炎大鼠造模经验和一些小细节？非常感谢🙏

Dr_劉医生

【慢性盆腔炎大鼠造模方法】1、动物和菌液 Wistar 大鼠。麻醉用品(如戊巴比妥钠),细菌悬液(大肠杆榭、金黄色葡萄球菌,溶血性链球菌按 2t1：1 混合,用元菌盐水稀释,浓度为 30 亿/ml混合菌)或大肠杆菌液。2、模型制备用戊巴比妥钠(50mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠,在无菌条件下,取下腹部正中切口长约 0.8～1cm,开腹后暴露寻找大鼠双角子宫,在双角子宫分叉处进针,先物理损伤子宫内膜

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问腺病毒293A细胞状态

Dr_劉医生

试试在传代前检测一下细胞活性，不行的话只能重新购入细胞株

3 回答576 围观

问感觉GM-CSF和IL-4诱导出来了巨噬

loveliufudan

可能是您诱导出了巨噬细胞。巨噬细胞在贴壁培养条件下容易形成集群，而且在细胞形态上与树突状细胞有所不同。您可以尝试使用其他方法（如细胞表面标记物、基因表达谱等）来确定这些细胞的类型。同时，为了避免因细胞的类型不确定而对实验结果造成影响，建议您进行相应的实验对照。

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问质谱图在生物医学中作用

sswei

质谱图用二维方法来看。横坐标代表的是分子离子峰及碎片峰，这有助于判断物质的分子量及可能的主要结构。纵坐标代表的是分子碎片的稳定程度，这有助于判断碎片相近物质区分，比如可以通过质谱图直接判断二甲苯的三种构型，就是利用这个方法。质谱图分析1、核对质谱图首先要核对质谱图是否合理，比如基峰，一张谱图只能有一个基峰，如果检测器调整的不合适或者样品浓度过大，则会有很多基峰。另外要观察同位素峰是否存在，有的同位

3 回答974 围观

问小鼠模型批次效应

Dr_劉医生

小鼠批次基本不会影响，影响的是小鼠品系类型，用稳定的杂交品系小鼠做敲除小鼠即可。小黑鼠用C57BL/6，小白鼠用BALB/c

3 回答506 围观

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