• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        IgG也有目的条带,但是比实验组的IP样品弱,怎么办

        相关实验:免疫共沉淀(Co-IP)

        user-title

        实验室小助理夏奇

        wx-share
        分享

        3 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        igG条带弱可能是由于裂解液中的去垢剂浓度太高或配方过于剧烈、蛋白与蛋白之间的相互作用太弱或不太稳定等原因导致。相应的举措有:1、降低去垢剂浓度或更换去垢剂种类;2、受蛋白的亚细胞定位影响,则新选择裂解液配方来释放目的蛋白;3、选择亲和力更高的抗体以捕获更多的目的蛋白,从而捕获更多的相互作用蛋白;4、选择目的蛋白或相互作用蛋白含量高的样品进行免疫共沉淀实验。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        可能有以下几种原因:

        目的蛋白与珠子本身或IgG有非特异性结合,导致背景高。

        IP抗体浓度太低,导致目的条带较浅。

        IP抗体特异性不好,导致杂带干扰。

        IP样品中加入了过多的细胞或组织裂解液,导致信号稀释。

        user-title

        赛默飞世尔科技

        有帮助

        这是因为背景没有洗干净。可以尝试多洗几次,或是加强洗脱缓冲液的条件。如果是琼脂糖介质,会有非特异性吸附,可以尝试用磁珠来解决。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序