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实验问答

23,117,087 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问求助！求一个RAW264.7巨噬细胞极化CD86和CD206流式双染protocol

loveliufudan

以下是一个基本的RAW264.7巨噬细胞极化的CD86和CD206的流式双染实验协议。请注意，该协议可能需要根据实验条件和实验室特定要求进行优化和调整。材料：- RAW264.7巨噬细胞- 细胞培养基（适当的培养基根据实验需求选择）- 胶体金标记的抗CD86抗体- 荧光标记的抗CD206抗体- 细胞染色缓冲液（如PBS）步骤：1. 将RAW264.7巨噬细胞培养在适当的培养基中，使其达到适当的细胞

1 回答1060 围观

问阿霉素干预足细胞时培养基含双抗

土井挞克树

不建议用双抗培养基可能会增强阿霉素的作用

3 回答186 围观

问凝胶阻滞实验中，需要观察DNA时，可以用肝素或者SDS置换DNA，这是为什么呢，请教

sswei

SDS离子型表面活性剂，能溶解细胞膜和核膜蛋白，使核蛋白解聚，从而使DNA得以游离出来。

3 回答1066 围观

问WB电泳求助，条带直接炸裂

huarenqiang5

考虑是电泳速度过快或电泳时温度过高或电压过高导致。

3 回答429 围观

问甲醇氯仿法提蛋白怎么测浓度？

huarenqiang5

烘干后可以使用尿素溶液进行溶解来测蛋白浓度。

4 回答2353 围观

问幽门螺旋杆菌液体培养时需不需要震荡呢？

loveliufudan

需要震荡，因为幽门螺旋杆菌是一种微需氧菌，需要在含有5%~8%氧气的微环境下生长。在液体培养基中生长更加困难，因为在液体里面更难保证菌体必需的微需氧环境和营养物质的稳定，以及有害产物的持续扩散。因此，液体培养时，必须设法使培养液不断地摇动以克服上述不利因素，例如可以使用恒温摇床进行幽门螺旋杆菌的液体培养。

3 回答555 围观

问CO ip实验中A蛋白拉B蛋白能行，但是B拉不出A是什么原因？

balalaLy

那可能是B抗体的问题，抗原抗体结合力弱

3 回答1672 围观

问求问下卵巢早衰大鼠的模型好不好造模呀？具体怎么制备？感谢感谢回复🙏

huarenqiang5

不同剂量顺铂腹腔注射建立大鼠化疗损伤性卵巢早衰模型方法取48只雌性未生育Wisar大鼠分为6组，每组8只。在不同时间点腹腔注射不同剂量CP。对照组（A组）无处理;CP腹腔小剂量（1.5 mg/kg）注射1组（B组）、小剂量（2.0mgkg）注射2组（C组）和小剂量（2.5mg/kg）注射3组（D组），均每日1次，连续5d;CP腹腔注射大剂量 1组E组），4mg/

3 回答264 围观

问Haploview文件格式

loveliufudan

Haploview对于PED格式文件有一定的限制和要求。根据你提供的错误信息，出现了无效的性别或患病状态的错误。在PED文件中，第5列表示性别，一般使用数字来表示，其中1表示男性，2表示女性，0表示未知性别。类似地，第6列表示患病状态，通常使用数字表示，其中1表示患病，2表示不患病，0表示未知患病状态。根据你的描述，你不知道个体的性别和患病状态，因此你可以将这些未知的值用0表示。然而，根据Hapl

2 回答652 围观

问免疫组化Ki67没有阳性结果

loveliufudan

如果在进行免疫组织化学染色（IHC）过程中没有观察到预期的阳性结果，可能有多种潜在问题。以下是一些可能导致问题的因素和建议的解决方法：1. 组织固定和处理：确保福尔马林固定的组织处理得当，固定时间足够，并且在石蜡包埋和切片制备过程中没有出现问题。确保切片切割质量良好且组织未被破坏。2. 热修复：柠檬酸钠热修复用于恢复组织中的抗原表达，如果修复时间或温度不足，可能导致抗原未能完全恢复。尝试增加修复时

3 回答1079 围观

问在acknowledgement中标注共同一作算吗？

loveliufudan

在学术论文中，作者的贡献通常在作者列表中进行明确标注，而不是在致谢部分。因此，如果你在论文中有共同一作的作者，最好将其明确标注在作者列表中，而不是在致谢部分。在一些期刊或会议论文的作者列表中，可能会提供一些特殊的标记或符号来表示共同一作。例如，使用星号 (~B、字母（a,b,c...）或其他符号来标识共同一作的作者。这样的标记方式可以在文章标题下的脚注或作者列表中进行说明。然而，标注共同一作的方式

3 回答694 围观

问菌移植实验的方法和技术要求

loveliufudan

进行菌移植实验时，菌种的活化与给予方式和实验设计有关。以下是一般情况下的考虑：1. 菌种活化：如果你使用的是冻存菌株或冷冻保存的菌种，需要先进行活化。活化过程包括从冷冻状态中取出并在适当培养基中培养，以恢复其生长状态和活力。具体的活化步骤取决于菌株的特性和所用的培养基，请参考相关菌株的培养条件和文献方法。2. 给予方式：菌种的给予方式可以是灌胃或灌肠，具体取决于实验设计和研究目的。灌胃是通过胃部将

3 回答872 围观

问老师们好，请问WB电泳液转膜液用太久了对结果有影响吗？原理是什么呀？

balalaLy

一般用过4、5次是没有问题的，用太多次会引入许多杂质，影响电流。

3 回答2960 围观

问请问一下，怎么鉴别制备的M13 DNA 是单链还是双链？感谢！

sswei

看碱基,有T为DNA.双链DNA分子中碱基必须符合A=T且C=G,只要有一项不符合就只能是单链.

3 回答550 围观

问第一个是阳性对照其他是样品，样品原浓度跑pcr跑不出条带，这是稀释十倍跑出来的，2p跟稀释十倍差不多，稍微亮一点，怎么样把它提亮

loveliufudan

可以尝试以下方法来提亮条带：增加PCR循环数：延长PCR反应的循环数，以增加目标序列的扩增。请注意，过多的PCR循环可能导致非特异性扩增。使用增强剂：添加PCR增强剂，如PCR增强剂或增效剂，可以提高PCR的灵敏性和特异性。调整引物浓度：尝试不同浓度的引物来确定最佳浓度，以提高PCR的效果。优化PCR条件：进一步优化PCR条件，包括退火温度、延伸时间等，以获得更好的PCR结果。

3 回答319 围观

问12号晚上用到了疑似有白色念珠菌的板里，晚上4度保存。13号早上放到水浴锅升温后有白点，白点在室温放置了一会变淡，之后变气泡

麻黄连翘赤小豆

染菌了，升温只是看得更清楚，建议重新换板子

3 回答431 围观

问基础医学硕士研究生毕业要求

灵枢天问

只要你做的够全面，把能做的实验都做了一定可以过

3 回答340 围观

问类囊体膜提取

loveliufudan

丙酮（丙酮酮或丙二酮）是一种有机溶剂，通常是无色液体。它在常温下具有较低的溶解度，约为24.7克/100毫升。这就是为什么丙酮不易溶于水的原因。如果你想配制80%的丙酮溶液，可以考虑使用以下步骤：1. 准备测量容器：选择一个容量合适的容器来配制溶液。确保容器干净且无污染。2. 加入丙酮：将所需的丙酮量慢慢倒入容器中。请注意，丙酮具有挥发性，所以在操作时要小心避免丙酮的散失。3. 加入水：向容器中加

2 回答902 围观

问摩尔计算，实在搞不懂了

土井挞克树

浓度是150mmol/l的话每天150ml那么就是150x150/1000的摩尔数

5 回答676 围观

问免疫组化封闭液中叠氮化钠可以用其他试剂代替吗？

Leo2019

如果要用类似的产品起到抑菌作用，可以使用牛莎PC-950来替代叠氮钠

4 回答1313 围观

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