OutlastR4MO
同样的细胞文献里5um,甚至还有0.5um就能做出来,我自己去年用10um的浓度处理24h倒是可以诱导出来。今年复现不出来了,浓度提高到25um了都不行,铺板数、细胞代数、作用时间都和以前一样,erastin也是新买的,结果镜下看细胞活的好好的,和对照相比tfr1,gpx4等蛋白的表达完全没有差异。。真的是服了,目前不想吊死在这棵树上了,打算换rsl3,请问后者是不是诱导效果比较稳定?
土井挞克树
rsl3诱导效果比较稳定,可以提高药物浓度后再试一试,另外一定要先检查一下erastin是否在有效期内再诱导
huarenqiang5
rsl3诱导效果相对来说要稳定些。
loveliufudan
尽管Erastin是一种被广泛使用的药物来诱导铁代谢异常和铁死亡,但不同实验条件下,药物的效果可能会有所差异。
对于你遇到的情况,有几个可能的解释和建议如下:
1. 药物浓度选择:不同实验条件下,药物的最佳浓度可能会有所不同。尽管文献中报道了特定的Erastin浓度,但这并不意味着它一定适用于所有实验。你可以尝试在较低的浓度范围内进行药物浓度优化实验,以找到最适合你的实验条件的浓度。
2. 药物质量和保存条件:尽管你购买了新的Erastin,但确保它的质量良好并正确保存仍然很重要。确保药物没有过期并存储在适当的温度和湿度条件下。此外,检查药物的纯度和有效性,可以尝试使用新的批次或来源的Erastin。
3. 细胞状态和处理时间:HUVEC细胞的状态和响应性可能会因时间、通量、细胞密度等因素而有所不同。确保你的细胞在最佳状态下,尝试优化处理时间和细胞密度,以确保药物处理的一致性和稳定性。
4. 选择其他药物:如果Erastin在你的实验条件下无法提供稳定的诱导效果,你可以考虑尝试其他药物,例如RS13或其他相关的药物。选择适合你研究目的和实验条件的药物,可以进行适当的浓度优化和实验验证。
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