在细胞培养过程中总发生细菌污染怎么回事?

主要考虑以下几点原因:操作技术不严格，试剂质量不达标，大气中孢子计数增加，培养箱或操作台使用和维护不当，污染了的冰箱和水浴锅。因此，在细胞培养过程中，操作者不仅要严格遵守标准的操作程序，同时还要特别注意新产品、新品牌、以及设备的清洁维护。

可能是器皿消毒不彻底，培养过程中注意无菌操作，培养前注意环境和物品消毒可以降低污染率

可能原因很多，比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等。关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中（不加细胞），37℃试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。

在细胞培养过程中，细菌污染的发生可能有几个原因：

1. 实验室条件：实验室环境的卫生条件是细菌污染的主要来源之一。如果实验室的清洁度不够高或操作不符合无菌技术的要求，细菌可能进入培养器具、培养基或试剂中，从而导致细菌污染。

2. 培养器具和试剂：培养器具、培养基或试剂可能受到细菌污染。如果培养器具没有进行适当的灭菌处理或在处理过程中受到污染，细菌可以进入细胞培养体系。同样，培养基或试剂如果未经过适当的灭菌处理或长时间开放在不洁净环境中，也会引入细菌。

3. 操作失误：操作人员的技术操作失误可能导致细菌污染。例如，如果操作人员在无菌条件下打开培养器具的盖子或接触无菌培养基表面，就可能引入细菌。

4. 培养细胞本身：有时，细菌污染可能是由于细胞株本身存在细菌感染。某些细胞株可能天然携带细菌，尤其是在长期培养过程中。这些细菌可能会繁殖并导致培养物的细菌污染。