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        流式检测细胞周期细胞数少的问题

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        JohnYin

        细胞消化下来放入70%乙醇固定(双蒸水配),4℃固定过夜,第二天离心(这时能看到有细胞沉淀),等再用PBS洗涤后就看不到细胞沉淀了,流式上机显示细胞数也较少。请问有什么办法可以解决?增加离心力还是增加离心时间?细胞固定后是不是增加离心力没那么破了?

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        2 个回答

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        土井挞克树

        有帮助

        增加离心时间,离心力过大也会对细胞产生破坏

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        可能是由于固定和离心过程中的一些问题导致的。以下是一些建议来解决这个问题:

        1. 增加离心力:如果您在离心过程中没有使用最大速度进行离心,您可以尝试增加离心力,以增加细胞的沉淀。确保使用合适的离心参数,如适当的离心速度和时间。

        2. 增加离心时间:如果使用了适当的离心力但仍然没有观察到足够的细胞沉淀,您可以尝试增加离心时间。延长离心时间可能有助于让细胞更好地沉淀下来。

        3. 调整固定条件:您可以尝试调整细胞固定的条件。有时候,固定条件可能需要优化,以确保细胞在离心后保持完整性。您可以尝试使用不同浓度的乙醇进行固定,或者尝试其他固定剂(如甲醛)来查看是否能够提高细胞的沉淀效果。

        4. 优化洗涤步骤:在使用PBS洗涤细胞时,确保洗涤缓冲液的体积足够大,以确保细胞能够完全沉淀。此外,注意洗涤的次数和洗涤的强度,以确保细胞不会被冲掉。

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