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        细胞慢病毒稳转后会有明显细胞活力改变吗?若改变,该如何处理?以及用稳转系肿瘤细胞构建皮下注射的移植瘤模型是否有免疫原性问题?

        相关实验:细胞转染

        user-title

        dxy_02vx0lr9

        目前我们实验室使用稳转系构建了小鼠的皮下荷瘤模型,成瘤速度与普通细胞无异,但肿瘤生长极度缓慢异常,想知道有何改善方案?

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        3 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        如果病毒对细胞有毒性的话是会影响细胞活力的,这种情况建议降低病毒滴度。

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        loveliufudan

        有帮助

        细胞稳定转染慢病毒后,有时可能会观察到细胞活力的改变。这种变化可能是由于多种因素引起的,例如病毒本身的影响、转基因表达的效应以及可能的细胞适应性等。以下是一些建议来处理细胞活力改变的情况:

        1. 优化稳转条件:确保使用适当的病毒滴度和适当的感染时间来最大程度地减少病毒对细胞的毒性。您可以尝试不同的病毒滴度和感染时间,以找到最适合您的细胞系的条件。

        2. 筛选稳转细胞:如果细胞活力的改变是由于转基因表达引起的,您可以考虑进行稳转细胞的筛选。使用适当的筛选标记(如抗生素耐受基因)来筛选具有稳定转基因表达的细胞群体。

        3. 细胞适应性培养:有时细胞可能需要一些时间来适应转基因表达或慢病毒感染。您可以尝试将稳转细胞在培养基中继续培养一段时间,以便细胞适应和恢复。

        关于用稳转系构建皮下移植瘤模型的免疫原性问题,这也是需要考虑的重要因素。稳转系所表达的外源基因或蛋白质可能会被宿主免疫系统识别为异物,导致免疫反应。为了减少免疫原性问题,您可以考虑以下方法:

        1. 使用小鼠作为模型:尽量使用与稳转系来源相同品系的小鼠作为移植瘤模型,以减少异种移植引起的免疫反应。

        2. 预处理细胞:对稳转系进行预处理,例如,使用低毒性的化学物质(如Mitomycin C)或低温冻存来减少其免疫原性。

        3. 免疫抑制:使用免疫抑制剂来抑制宿主免疫反应,减少免疫原性。但是,使用免疫抑制剂需要仔细权衡其潜在的副作用和实验目的。

        对于肿瘤生长缓慢异常的问题,您可以考虑以下改善方案:

        1. 细胞传代:尝试将肿瘤细胞进行传代,以提高其生长速度和增殖能力。

        2. 优化移植瘤模型条件:调整移植瘤模型的实验条件,例如种植细胞数量、种植部位、移植瘤前的细胞培养条件等,以寻找最适合细胞生长和肿瘤形成的条件。

        3. 考虑使用其他细胞系:如果使用的细胞系一直表现出生长缓慢异常,您可以尝试使用其他更适合的细胞系来构建移植瘤模型。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        细胞慢病毒稳转后会有细胞活力改变。建议在感染期间根据细胞生长的情况及时换液,以保证细胞良好的生长状态。

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