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重叠延伸pcr
loveliufudan
有几个可能导致浓度低的原因和解决办法:1. 模板浓度问题:你在第一步PCR中使用三个片段以相等的摩尔比例作为模板,但没有加入引物。由于没有引物的引导,可能只有部分模板成功扩增。这可能导致模板浓度较低,从而影响下一步PCR的效果。解决办法是在第一步PCR中添加引物,使得每个片段都能够扩增。2. 引物选择和浓度问题:你在第二步PCR中添加了上下游引物,但提到引物含有酶切位点,同时Tm值较高。高Tm值的
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问
请教一下大神,最近在养MLE-12细胞,目前传代用的是完全培养基含有2%FBS。准备用LPS干
土井挞克树
建议添加少量血清,可以中和ph提高营养。
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问
求解~阴性对照组细胞死亡
土井挞克树
可以考虑降低阴性组的细胞密度,考虑是细胞密度太大了
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问
提取脐带血cd34细胞
土井挞克树
可以用红细胞裂解液把红细胞裂解掉,然后再离心去除
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问
请问C3H10T1/2小鼠间充质干细胞成骨诱导的茜素红染色这样算成功了嘛?
土井挞克树
是钙结节,但是你染色时间太长了,建议减少染色时间
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问
求助:TGF-β1刺激巨噬细胞RAW264.7有效浓度
土井挞克树
文献的浓度是参考浓度,建议你提高浓度直到测出阳性
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问
怎样检测受体活性
loveliufudan
确定受体活性的最优剂量通常需要进行一系列实验和测定。以下是一些常见的方法和实验设计,可用于评估受体活性并确定最佳剂量:1. 结合测定法(Binding Assays): - 结合测定法可用于评估受体与其配体之间的亲和力和结合能力。常用的方法包括放射性配体结合测定(Radioligand Binding Assay)和荧光标记配体结合测定(Fluorescence-labeled Ligand
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问
求助,如何向小鼠血管壁注射药物
土井挞克树
可以使用微量注射器向血管壁注射药物
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问
创面感染呈绿色,除了绿脓杆菌,还可能是什么菌?
loveliufudan
除了绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa),还有几种细菌可能导致创面感染并呈现翠绿色:1. 嗜酸乳杆菌(Streptococcus pyogenes):有时可以引起翠绿色的脓液。2. 嗜麦芽芽孢杆菌(Bacillus cereus):这种细菌可以引起多种创伤感染,有时导致绿色分泌物。3. 肠杆菌属细菌(Escherichia coli):某些株型的大肠杆菌可能会引起创面感染,并产
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问
请问如何构建突变体?
sswei
可采用CRISPR,T-DNA 插入,EMS 诱变等方法可以创造基因缺失突变体。
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问
H₂O₂诱导衰老时,除了设置空白对照以外,还可以怎样设计实验支持衰老现象是 H₂O₂引起的?
loveliufudan
在研究衰老过程中,除了设置空白对照组外,还可以采取以下实验设计来支持衰老现象与H2O2引起的关联:1. H2O2处理组:将细胞或生物体暴露于适当浓度的H2O2处理,以模拟衰老过程中氧化应激的作用。可以在不同时间点或浓度下进行处理,以观察细胞或生物体的衰老现象,如细胞增殖能力下降、DNA损伤、细胞周期改变等。2. 抗氧化剂处理组:在H2O2处理组中加入抗氧化剂,如N-乙酰半胱氨酸(NAC)、谷胱甘肽
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问
如果用小鼠的不同组织进行切片和X-gal染色,观察到的蓝色细胞一定是衰老细胞吗?为什么?
sswei
常常检测SA-β-gal的活性将衰老的细胞和处于分裂静息期或者是终末分化状态的细胞区分开来,是目前应用最为广泛的细胞衰老的标志物之一。SA-β-gal检测方法主要分为细胞化学染色法和荧光法,人为给予β-gal作用底物X-gal和pH6的环境,衰老细胞可以在β-gal的作用下,将底物转变为深蓝色,使得发生衰老的细胞在普通光学显微镜下即可观察到。这种方法也具有一定的局限性。首先,SA-β-gal在正常
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问
降解酶的选择该怎么进行实验
loveliufudan
设计一个实验方案来比较不同种类和酶活的酶对同一底物的降解效率是可行的。下面是一个可能的实验设计:1. 选择底物:确定您要测试的底物,这是酶反应的目标物质。确保底物选择合适,能够被待测试酶降解,并且可以在实验条件下进行检测。2. 选择酶:选择一组具有不同种类和酶活的酶。可以通过文献调研或者专业知识来选择这些酶。确保这些酶能够催化底物的降解,并且在实验条件下稳定活性。3. 设计酶反应实验:为每个酶准备
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问
冻存的肿瘤还可以做流式么
loveliufudan
是的,您可以使用冻存的肿瘤样本进行流式细胞分型的检测。冻存样本在一定条件下可以保存细胞的完整性和免疫表型。以下是一些建议:1. 解冻肿瘤样本:从冻存状态中快速解冻样本,最好在37°C的水浴中进行。避免反复冻融,因为这可能会对细胞造成不利影响。2. 细胞检查:解冻后,检查样本中的细胞完整性。使用显微镜观察细胞的形态,并确保细胞没有明显的损伤或破坏。如果细胞完整性不好,可能需要考虑其他方法或使用新鲜的
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问
SPR实验,蛋白相互作用
是TTT
含量比较多的话透析的话比较好,以免影响最终结果
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问
合理吗?原理和流程都懂,Co-IP做不出来!
是TTT
用好一点的琼脂糖珠子,用ip级的抗体,孵育在4℃,如果这三点都做到了,还做不出来,估计是相互作用是瞬时的,太快了导致co-ip捕捉不到,此时需要换别的手段检测,例如邻位连接
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问
LPS刺激raw炎症模型
是TTT
结合阳性药的结果看,考虑没刺激起来的可能性更大,lps刺激时间可以延长到8小时以上,同时多肽浓度也可以降低一些
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问
核酸检测前吃糖对结果有影响吗?
是TTT
吃糖对核酸检测是没有什么影响的
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问
核酸检测试剂常温保存时间是多少?
是TTT
未拆封前是18个月,但是如果天气较热,超过了30℃,保质期会缩短
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问
按微生物学控制原理分类的实验动物有哪些?
是TTT
按微生物学控制原理分类的实验动物有无菌、清洁、普通动物三类
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