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问
产气袋一次能够用多久?
dxyc42u
2.5L的那个一般够用2-3天
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问
细胞免疫荧光细胞一块一块的是怎么回事?细胞没有铺均匀嘛?
balalaLy
细胞太满了,换液的操作容易将细胞成片成片得冲下来。做免疫荧光建议用24孔板。细胞不要太密
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问
培养幽门螺旋杆菌,培养皿全程一定要倒置吗?不倒置会有什么影响?
dxyc42u
将培养皿倒置培养是为了减缓培养皿内培养基水分的蒸发,也为了方便取用。因为培养皿盖子大而底小,如果正着放,取用时容易只拿到盖子,从而造成平皿内培养基的暴露。而且倒置可以防止在实验过程中,培养皿内的水汽在皿盖上冷凝成水珠滴落到培养基上,将杂菌引入培养基,造成污染,从而影响到培养基中微生物的生长。有时候培养的目标是收集细菌的代谢物,然而代谢物有些会易溶于水,而培养皿正放时候盖上会出现蒸馏水,造成菌落成片
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问
菌液测序结果
dxyc42u
只测出1000是不正常的,后面测不出考虑还是引物设计的问题
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问
植物蛋白质提取方法和动物蛋白质提取方法主要有什么区别?
dxy_mqg1dtg8
以下是两种类型蛋白提取方法的主要区别:1. 细胞破碎方法由于植物细胞壁的存在,植物蛋白提取需要先破碎细胞壁才能获得细胞质中的蛋白。植物蛋白提取可以使用研钵研磨、液氮破碎、超声波处理等方法来破碎细胞壁。而动物蛋白提取则通常采用机械破碎、超声波处理、高压均质等方法来破碎细胞膜。2. 提取缓冲液植物蛋白提取需要特定的提取缓冲液,以帮助提高蛋白质的溶解度和稳定性。在植物蛋白提取缓冲液中,常添加还原剂、螯合
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问
真菌污染
sswei
从镜下看明显是受到真菌污染了。
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问
收的新鲜的wnt3a CM没有活性会是什么原因?
sswei
wnt3aCM无活性原因可能是纯度不足或失活。
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问
油脂添加到细胞中,能融合在一起嘛
sswei
油脂还能用水溶性界面活性剂:如十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠等溶解。
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问
免疫组化求助
dxyc42u
考虑用的抗体特异性不强导致的,换个抗体试一试
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问
求助|小鼠脑冰冻切片
sswei
问题根源在于固定液和蔗糖液配置,一定要用PH7.4 PBS配置固定液和蔗糖液。用非PBS固定和沉糖会破坏膜结构,所以是造成空洞状的根源。另外在冰冻切片时,要掌握好温度,不易过低或过高。
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问
甲型副伤寒沙门氏菌生物膜实验
王堇文
我就是做QS系统的,这个有时候和YP菌活性也有关系,做的时候一般用培养到对数后期的菌比较合适,因为生物膜会有个形成消散的过程,这边建议你做时间梯度,24 36 48取样
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贴壁细胞RNA提取
谦谦千千
建议不用胰酶,因为它会对该实验有影响,直接加入trizol裂解数分钟用细胞刮刀刮下进行后续实验
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问
T细胞激活问题
dxyc42u
总因子直接刺激效果不理想,包被靠谱些
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问
培养的3T3成纤维细胞形态不好是什么原因?
sswei
细胞密度较高的情况下,细胞可能倾向于保持未分化状态,从而导致细胞形态不好。
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问
免疫组化染色
dxyc42u
第一次做的话建议先搞预实验,做几个片子试一试,后面一个基因搞一张片子
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问
怎么检测细胞内粘度
dxy_mqg1dtg8
检测细胞内粘度或粘性的方法有很多种,以下是其中几种常用的方法:1. 球形落体法(Ball-drop method)该方法是通过让小球自由落体并记录下来下落时间和距离等参数来计算出粘度。这种方法需要使用特定的装置和设备,因此需要进行一定的准备和实验操作。2. 微流控技术(Microfluidic technology)微流控技术可以通过在通道中注入不同浓度的聚合物或纳米颗粒,根据其在通道中的运动速度
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问
细胞消化所需时间变长
谦谦千千
1.细胞密度太大2.细胞消化前没有使用PBS洗3.确保胰酶的活性,是否反复冻融导致活性降低
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问
小鼠胆结石模型 计算胆固醇饱和指数的时候
sswei
胆固醇甘油三酯运输需要磷酯等包被,在测定胆固醇饱和指数前要测磷酯。
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问
要曝光很长时间才能观察到荧光,原因是什么?
谦谦千千
可能是染的荧光比较弱,表达量低;也有可能是在染荧光后没有使用荧光淬灭剂,荧光淬灭了;还有可能是拍的时间太久,导致荧光淬灭。
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问
感染悬浮细胞或半悬浮细胞时,没有平角离心机怎么办?
王堇文
准备干净的10ml 15ml离心管,转移进离心管进行离心就好
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