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        edu染色488和33342为什么会这样啊

        相关实验:细胞增殖检测实验

        user-title

        dxy_7a6tdovr

        请大佬们解答一下,为什么荧光染色出现这种情况,33342细胞核和膜都亮了,488膜亮了就和没进核一样,求求了,急图片描述图片描述图片描述

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        3 个回答

        user-title

        sswei

        有帮助

        结果提示细胞的增殖能力减弱了。

        user-title

        dxy_7a6tdovruser-title

        老师,这个是怎么分析出来的,能给我讲一下吗

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        可能是由于几个因素引起的:

        1. 荧光染料渗透:有可能你的HOECHST 33342不仅染色了细胞核,也染色了细胞质。这可能是由于渗透作用,尤其是在高浓度或长时间孵育的情况下。

        2. 细胞固定和渗透步骤:固定和渗透步骤对荧光染料的进入细胞内部起关键作用。如果使用的固定剂或渗透剂不恰当,可能会影响荧光染料的分布。

        3. 具体的抗体或标记物:对于你的488染料,可能你的目标抗原主要位于细胞膜,而不是细胞核。另外,如果使用的是间接免疫荧光,那么二抗选择也非常重要。

        4. 洗涤步骤:如果洗涤步骤不够充分,可能会导致背景信号增强,给人一种“膜亮了”的感觉。

        在解决这个问题时,你可以尝试调整HOECHST 33342的浓度和孵育时间,改变固定和渗透步骤,或者检查你的抗体或标记物是否正确。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        染剂未入核一般是染色时间短或细胞状态差的原因

        user-title

        dxy_7a6tdovruser-title

        老师,能详细说说吗,或者文章

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