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问
加细胞悬液是直接加到100μl培养基里还是细胞悬液体积+培养基一共100μl?
huarenqiang5
加细胞悬液一般情况下都是直接加到100微升培养基里面。
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问
如何准确进行细胞计数?比如获取准确数量的少量细胞。
huarenqiang5
在计数板上用显微镜自己数出来就可以获取准确数量的少量细胞。
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问
悬浮细胞总是在孵抗体和洗的时候被冲掉,悬浮细胞做免疫荧光怎么固定;
土井挞克树
悬浮细胞固定:细胞长好后一定固定好,非常影响后面拍片,4% 多聚甲醛、甲醇、丙酮均是可选用的固定液,固定时间在 10-15 分钟即可。记得之前用PBS清洗一次;另外可以使用PDL处理过的玻片,效果还行,很少脱片。
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问
荧光淬灭太快(几秒钟就消失了还没来得及拍就全黑了)可能是什么原因呢?该怎么改进呢?
土井挞克树
可加防荧光淬灭剂,或者你速度快点以及在激光照的时候再拍照,不拍的时候移开玻片
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问
多颜色共同免疫荧光,最多选几个颜色,选哪些颜色的串色发生少?免疫荧光,或者激光共聚焦哪个好?
feixue7758527w
不知道最多选几个颜色,我所知道的实验大多就是两个染色的,最多也就是三个颜色,再多就不知道了。
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问
组织成像时40倍物镜模糊,调整焦距不能解决,细胞40倍物镜就很清楚,什么原因?同一张片子,20倍物镜可以清晰,10倍物镜就茫茫一
feixue7758527w
我觉得还是你的片子切的太厚了,放大倍数越大,要求组织切片越薄,否则就是看不清的。
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问
组织样品可以做这个凋亡实验吗?还是只能用细胞样品?
sswei
对各类组织样品的组织切片也可以用来做凋亡实验,但是比较复杂。
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问
请问annexin V与PI和与7AAD有何区别?
sswei
Annexin V分子量35KDa左右,是一种钙离子依赖性的磷脂结合蛋白,当细胞发生凋亡时,磷脂酰丝氨酸会从膜内外翻,Annexin V与外翻后的磷脂酰丝氨酸具有很高的亲和力,此时将FITC这种荧光蛋白标记在Annexin V上,便可以利用流式细胞仪进行检测。PI是核酸染料,不能穿过活细胞膜,当细胞膜出现破损时,PI可进入细胞并结合核酸。7-AAD (7-amino-actinomycin D)是
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问
单标样品的制备方法?不同实验目的或者目标细胞,单标的制备是否有差异?
sswei
不同实验目的,单标制备有一点差异。
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问
各位老师好,正常组细胞坏死占10%-20%可能是什么原因,同样操作的用药组细胞坏死约6%,正常组坏死都偏高
sswei
可能的原因有正常组细胞冻存或复苏过程中损伤;培养液种有毒代谢产物堆积等。
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问
厌氧梭菌涂板计数是为什么呀?
huarenqiang5
不可以用血细胞稀释计数,需要从新复苏培养24-48小时后进行计数。
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问
核蛋白提取时有浆蛋白污染怎么办
sswei
用 0.5 ml 预冷 PBS 重悬,10000 rpm,离心 3-5 分钟清洗沉淀可以减少胞浆蛋白污染
2 回答
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问
求助求助
huarenqiang5
测出来的荧光值几百-几万,你这几万在正常范围之内是可以的。
2 回答
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问
总蛋白可不可以作为实验组?为什么
feixue7758527w
总蛋白也是可以作为实验组的,但是也要看具体时间的,要注意排除混杂因素的,其他条件要一致。
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问
细胞加药培养后有一块地方细胞死了,能直接提蛋白跑wb吗?
feixue7758527w
可以直接提取蛋白跑WB的,但是也要具体分析,排除污染导致死亡的。
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问
先冻干在进行脱色脱脂还是先脱色脱脂再冻干
烧伤科常医生
你所表述的第二个步骤程序是正确的顺序
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1667 围观
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问
样品前处理中脱色脱脂需要什么试剂及仪器
烧伤科常医生
CBE-5/10L亚临界萃取实验装备,引入plc电脑控制技术,物料萃取设备改为快开结构,用程序自动控制料容比,萃取时间,温度,压力次数等参数,使操作更简便,得到的数据更准确。
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问
动物脱色脱脂是要先烘干弄成粉末,再加脱脂试剂进行脱脂吗
烧伤科常医生
我的经验是先烘干,然后再加脱脂试剂
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问
大肠杆菌倒入lb固体 37度培养后出现气泡
dxy_y2xcoxo3
你好 请问楼主后面解决了吗 气泡是因为什么原因产生了呢 我也有
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问
抑菌圈到底是哪一个呢
dxy_y2xcoxo3
你好 请问后来确定这个白色的圈是什么了吗
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