登录
搜索
提问
我要登录
|免费注册
首页
>
实验问答
>
蛋白质
实验问答
22,206,193 科研人在看
科研学霸天团,48小时有问必答
我要提问
全部
细胞
免疫
蛋白质
PCR
DNA
RNA
微生物
动物
遗传
生物信息
其他
问
ELISA实验标准曲线相关
juyue2010
个别出现偏差,可能是加样的问题,去掉即可。或重新检测
4 回答
367 围观
4 回答
367 围观
去回答
问
硫酸铵沉淀蛋白是加配制好相应饱和度的溶液还是直接直接加固体
loveliufudan
如果你想沉淀蛋白质,你需要先配制好相应饱和度的硫酸铵溶液,然后慢慢加入到蛋白质溶液中,并不断搅拌均匀。直接加固体硫酸铵可能会导致局部过饱和或者不均匀,影响沉淀效果。
3 回答
679 围观
3 回答
679 围观
去回答
问
wb实验同样的操作条件和试剂,蛋白条带完全不一样,一个非常清晰一个几乎无条带,是一抗不行了吗?
balalaLy
抗体孵育时间,还有TBST的ph值也是会有影响的
5 回答
201 围观
5 回答
201 围观
去回答
问
western转膜之后,封闭之前要不要洗膜?还是转完之后直接放在封闭液里?
juyue2010
需要用PBST清洗一下,洗掉转膜缓冲液
7 回答
6692 围观
7 回答
6692 围观
去回答
问
DCA曲线问题
sswei
决策曲线分析是一种评估和比较合并临床结果的预测模型的方法,只需要对模型进行测试的数据集,并将其应用于具有连续或二分类结果的模型。因此,从该图形来看,难以做出合理的结论。
3 回答
435 围观
3 回答
435 围观
去回答
问
紧急求助 四环素诱导系统
loveliufudan
四环素诱导系统一般使用四环素或其衍生物,如强力霉素(Dox)作为诱导剂。脱水四环素盐酸盐也是一种四环素类似物,可以用于诱导基因表达。但是,不同的四环素类似物对tTA或rtTA的亲和力不同,可能影响诱导效果。此外,还要注意细胞培养血清中是否含有四环素或其衍生物,以免干扰系统的调控。
3 回答
878 围观
3 回答
878 围观
去回答
问
丙酮固定细胞会掉怎么办
loveliufudan
使用丙酮固定细胞时,需要注意固定时间和温度。固定时间太短或温度太低,可能会导致细胞未被充分固定而易于脱落。此外,使用PBS或者其他缓冲液洗涤细胞时,也需要轻轻摇晃孔板,避免过于强烈的震动导致细胞脱落。除了固定时间和温度,另外一些可能导致细胞易于脱落的因素包括:细胞密度过低或过高,都可能导致细胞易于脱落。转染试剂或细胞培养液的质量问题,可能会导致细胞易于脱落。细胞黏附能力较差或对特定基质无法黏附,也
4 回答
864 围观
4 回答
864 围观
去回答
问
求助WB 大分子条带消失的原因?
huarenqiang5
主要考虑以下几点原因:1)胶的浓度与目的蛋白的浓度不对应;2)蛋白质降解;3)上样量过多或过少及样品弥散。
6 回答
1323 围观
6 回答
1323 围观
去回答
问
请教,STAT3和p-STAT3 Western Blot蛋白检测
loveliufudan
通常情况下, STAT3 Western Blot检测所用的蛋白质提取物是包括细胞核、细胞质和细胞膜的总蛋白质。这是因为 STAT3是一种细胞内信号传导蛋白,存在于多种细胞结构中,因此要检测其全局表达水平,需要提取包括细胞核、细胞质和细胞膜的总蛋白质。在文献中,通常报道的是磷酸化状态的STAT3(p-STAT3)含量的变化情况,而不是总的STAT3含量。这是因为STAT3的磷酸化状态是其活性的指示
3 回答
5062 围观
3 回答
5062 围观
去回答
问
求助289kDa蛋白转膜条件及分离胶浓度
huarenqiang5
289KDa蛋白转膜建议用 4%的浓缩胶,6%的分离胶,湿转140v恒压3h。
3 回答
745 围观
3 回答
745 围观
去回答
问
有没有人用DIA-NN搜库的时候一直出现无法识别raw文件的情况啊
土井挞克树
可以下载一个修复的附件,就可以识别了
3 回答
613 围观
3 回答
613 围观
去回答
问
wb结果为什么背景比较黑且条带不清晰?
balalaLy
一抗二抗浓度高,或者洗膜不充分,适当调低抗体浓度,增加洗膜时间,或者提高洗膜液中tween20的浓度
6 回答
12941 围观
6 回答
12941 围观
去回答
问
ERK、JNK WB条带趋势
huarenqiang5
想要验证对MAPK信号通路的影响,建议做磷酸化的WB比较好。
3 回答
1841 围观
3 回答
1841 围观
去回答
问
有没有做过cell free表达蛋白的大神!
sswei
无细胞技术(cell-free)蛋白质表达上的应用,作为近年来单独列出的蛋白表达系统,主要用于表达膜蛋白等难以在细胞内获取的蛋白。膜蛋白在细胞间联系、表面识别、细胞骨架接触、信号传导、酶活性及物质运输中扮演了重要角色。由于其具有多种细胞功能,膜蛋白是非常理想的药物靶标。但是,膜蛋白的其复杂的优化过程使得纯化非常困难并且耗费时间。无细胞技术可以用来来获得高得率的可溶性的膜蛋白。在无细胞技术 无细胞技
3 回答
678 围观
3 回答
678 围观
去回答
问
血小板测蛋白可以直接冻吗
土井挞克树
短时间可以,时间长蛋白质会变性所以不建议。
5 回答
366 围观
5 回答
366 围观
去回答
问
western blot 相关实验
huarenqiang5
考虑以下几点原因:①. 因为蛋白上样量低或目的蛋白在来源组织或细胞中的表达量并不丰富造成。可适当加大蛋白上样量,也可通过提高抗体稀释度或采用灵敏度更高的发光底物来调整,如Enlight-plus。②. 蛋白没有充分转移到膜上。转膜后可通过预染Marker判断转膜效率,也可用丽春红染膜、用考马斯亮蓝染胶,判断转膜效率。③. 抗体效价不高,用量不足,孵育时间太短,或抗体反复使用保存不当而失活。可考虑更
5 回答
473 围观
5 回答
473 围观
去回答
问
COIP实验中INPUT无目的蛋白,pulldown中能砸到目的蛋白,why?
huarenqiang5
主要考虑以下几点:(1)样品中目的蛋白未表达或者表达量低。这种 情况下建议确定目的蛋白的蛋白谱,确定它会表达。(2)可以适当增加裂解液,但要注意后续要将裂解液去除干净。(3)抗体使用量少,没有足够的抗体去捕获目的蛋白。建议增加抗体的使用量。(4)缓冲液、洗脱液的pH可能不能将目的蛋白洗脱。建议根据想要洗脱的蛋白质,调整溶液正确的二pH值。(5)抗体没有与免疫吸附磁珠结合。注意查看磁珠与抗体亚型是否
4 回答
1003 围观
4 回答
1003 围观
去回答
问
请教一下各位老师关于ROC曲线位于参考线以下的问题
汤姆卜丽波
Roc就是该指标下的生存面积,原数据才是最准确的改动了后面的数据都对不上了
3 回答
1443 围观
3 回答
1443 围观
去回答
问
HL-60和NB4细胞诱导分化问题
dxy_bkhclvd4
我们做下来是0.5 uM浓度诱导大概4-6 d就有效果了呀?
5 回答
608 围观
5 回答
608 围观
去回答
问
类器官病毒包装进行稳转后续不需要药筛吗?
土井挞克树
稳转后不需要做药物筛选了,前期做就可以了
3 回答
168 围观
3 回答
168 围观
去回答
1
•••
66
67
68
69
70
•••
172
跳至
页
意见反馈
合作咨询
提问
扫一扫
实验小助手
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序