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        请教,STAT3和p-STAT3 Western Blot蛋白检测

        user-title

        dxy_jp9lqyf4

        STAT3 Western Blot蛋白检测,提取的蛋白是总蛋白(包括细胞核、细胞质、细胞膜)么?为什么文献里面一般STAT3含量保持不变呢?p-STAT3是提取的细胞核蛋白么?如果提取总蛋白检测p-STAT3可行么?

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        3 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        提取总蛋白检测p-STAT3会产生干扰,导致结果不准

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        STAT3 Western Blot蛋白检测,一般提取的蛋白是总蛋白。根据实验需要你也可以提取特定蛋白。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        通常情况下, STAT3 Western Blot检测所用的蛋白质提取物是包括细胞核、细胞质和细胞膜的总蛋白质。这是因为 STAT3是一种细胞内信号传导蛋白,存在于多种细胞结构中,因此要检测其全局表达水平,需要提取包括细胞核、细胞质和细胞膜的总蛋白质。

        在文献中,通常报道的是磷酸化状态的STAT3(p-STAT3)含量的变化情况,而不是总的STAT3含量。这是因为STAT3的磷酸化状态是其活性的指示器。当STAT3被磷酸化时,其活性会增加,从而调节下游的信号传导和基因表达。因此,通常情况下,研究人员会更关注STAT3的磷酸化状态。

        如果要检测p-STAT3,通常需要提取细胞核蛋白质,因为STAT3在被磷酸化后往往会转移到细胞核中,调节下游的基因表达。如果提取总蛋白质来检测p-STAT3,则需要在Western Blot实验中使用适当的抗体来检测磷酸化的STAT3,而不是未磷酸化的STAT3。在这种情况下,使用总蛋白提取物来检测p-STAT3可能会受到其他蛋白质的干扰,因此,提取细胞核蛋白质可能更加准确和可靠。

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