• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        HL-60和NB4细胞诱导分化问题

        相关实验:IPTG 诱导蛋白表达实验

        user-title

        DDDgreat

        看到文献上大多都为1umol/L ATRA和1.25%的DMSO,没有提具体细胞数和对应培养时的加液量,现在买的是Sigma的10mmol/L的ATRA,那怎么配诱导培养基?

        算下来1ml中只含0.01umol的ATRA。

        不知道哪里出问题了,反正是一直没做成功。请不吝赐教哟~

        wx-share
        分享

        5 个回答

        user-title

        群青2

        有帮助

        我们做下来是0.5 uM浓度诱导大概4-6 d就有效果了呀?

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        你可以做个梯度预实验按比例添加ATRA,找到合适的比例再大规模诱导

        user-title

        sswei

        有帮助

        A丅RA浓度太低,需要继续添加。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可以后续往培养基内添加atra的。添加到合适浓度

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        在HL-60和NB4细胞诱导分化的实验中,ATRA和DMSO是常用的诱导剂。一般来说,细胞数和加液量会根据不同实验室和具体实验而有所不同,但一般要考虑到诱导剂的毒性和浓度对细胞的影响。

        关于ATRA的浓度,10 mmol/L的ATRA确实是比较高的浓度,需要进行适当稀释才能达到常用的1 µmol/L。例如,将10 mmol/L的ATRA稀释1000倍,即将1 µL的10 mmol/L的ATRA加入1 mL的培养基中,可以得到1 µmol/L的最终浓度。当然,对于不同的细胞和不同的实验条件,需要进一步确定最适合的浓度。

        此外,DMSO是一个有机溶剂,可以溶解ATRA并帮助其渗透到细胞内,但高浓度的DMSO也会对细胞产生毒性影响。常用的DMSO浓度为1.25%,也可以根据具体实验进行适当的调整。

        最后,成功进行细胞诱导分化需要考虑到许多因素,包括细胞密度、诱导剂浓度和时间、培养基成分和温度等。如果实验一直不成功,可能需要进行一些优化和调整。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序