求助289kDa蛋白转膜条件及分离胶浓度

289KDa蛋白转膜建议用 4%的浓缩胶，6％的分离胶，湿转140v恒压3h。

转膜条件和分离胶浓度的选择取决于你要分离的蛋白质的分子量大小和电荷性质。

对于0.2的PVDF膜，一般使用较低的电压和较长的时间来进行转膜。常用的条件是100 V，1-2小时。转膜时间可以根据蛋白质的大小和转膜效率进行调整。如果蛋白质较小，则可以缩短转膜时间。如果蛋白质较大，则可以增加转膜时间或调整电压和电流密度等参数。

对于分离胶浓度的选择，一般需要考虑要分离的蛋白质的分子量大小。对于较小的蛋白质，一般使用较高的分离胶浓度，例如10-15%的SDS-PAGE胶；对于较大的蛋白质，一般使用较低的分离胶浓度，例如6-8%的SDS-PAGE胶。因此，对于你要分离的蛋白质，可以根据其分子量大小选择6%或8%的SDS-PAGE胶。如果不确定蛋白质的分子量大小，则可以使用多种不同浓度的SDS-PAGE胶进行尝试，以确定最适合的条件。

可以试一下7%的胶，用1.0的板，转膜90v3小时