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- BSP/MSP/DNA甲基化检测/修饰
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- 2025年07月13日
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真实实验服务商-普拉特泽生物
- 服务名称：
DNA甲基化检测/BSP/MSP
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样/指标
优秀案例展示
一、DNA甲基化技术原理
DNA甲基化是基因表达调控的一种重要机制，DNA甲基化检测是指利用各种方法对肿瘤细胞DNA甲基化程度进行测定。在恶性肿瘤的发展中，甲基化的状态并不是一成不变，肿瘤细胞内全基因组的低甲基化程度与疾病进展、肿瘤大小和恶性程度都有密切的关系，DNA甲基化检测对肿瘤恶性程度的判断有重要意义。
二、甲基化检测方法
1、亚硫酸氢盐测序法（Bisulfite sequencing PCR，BSP）
亚硫酸氢盐修饰后测序法（ BSP ） Frommer 等（ 1992 ）提出的研究 DNA 甲基化方法，此方法可靠性及精确度高，能明确目的片段中每一个 CpG 位点的甲基化状态。用亚硫酸氢盐处理基因组DNA，所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变。随后设计BSP引物进行PCR，在扩增过程中尿嘧啶全部转化为胸腺嘧啶，最后对PCR产物进行测序就可以判断CpG位点是否发生甲基化，称为BSP-直接测序法。将PCR产物克隆至载体后进行测序，可以提高测序成功率，这种方法称为BSP-克隆测序法。
特点：精确度高，能够准确检测出甲基化的程度百分比。
2、甲基化特异性的PCR（Methylation-specific PCR，MSP）
Herman 等（ 1996 ）在使用重亚硫酸盐处理的基础上新建的一种方法。该方法敏感性高，主要用于作定性研究。用亚硫酸氢盐处理基因组DNA，所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变；随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物，如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能得到扩增片段，则说明该位点存在甲基化；反之，说明被检测的位点不存在甲基化。
特点：适用范围广，能够检测特异位点是否发生甲基化。
三、实验流程
送检流程与交付标准
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文献和实验服务项目介绍 一、MSP（Methylation Specific PCR）法 服务内容：1. 基因组DNA的Bisulfite转化。 2. DNA甲基化检测——基于MSP（Methylation Specific PCR）法。 样品要求：1. 基因组DNA（≥1µg）。2. 若提供的材料为新鲜组织、血液、细胞等生物材料，请提供足够提取1µg以上基因组DNA的材料量。3. 基于所选择的DNA甲基化检测方法，请提供相应的引物或引物序列。 终产品：Bisulfite处理的基因组DNA；实验报告（包括
甲基化 MSP 特异性 PCR 全程的常见问题与相关控制措施
在 服务项目 内容说明 周期 价格 DNA CpG甲基化检测 MSP（Methylation Specific PCR）法，包括引物设计，不包括合成 1周 ￥1198/样品 三、BSP（Bisulfite Sequencing PCR）法 (PCR产物直接测序)服务内容：1. 基因组DNA的Bisulfite转化。2. DNA甲基化
组、PCOS-IR病人组以及正常人组，每组均有五位女性。 为了鉴定特异性的DNA甲基化片段，研究者设计了针对含特定甲基化片段的雌激素受体(estrogen receptor beta ,ER-β)基因的引物，进行特殊的PCR (methylation-specific PCR, MSP)，发现所有样品中甲基化片段大约为250 bp左右。 选取ER-β基因是因为该基因与PCOS疾病相关。 Figure 1. MS-PCR
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