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- 2025年07月15日
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自噬作为时下的研究热点，有非常深远的研究意义。汉恒生物经验丰富的自噬研究团队，可以为您提供自噬研究的整体服务，省时，节力，专业。
一、自噬病毒工具
汉恒生物有多种自噬病毒研究工具可以提供，便于直接感染目的细胞后直观地观察细胞自噬的整体水平；
1）GFP-LC3单荧光自噬指示病毒系统
GFP-LC3病毒系统可高效感染目的细胞，表达GFP-LC3，感染感染后细胞可在荧光显微镜下实时观察自噬的整体水平；
由于电镜耗时长，不利于监测（Monitoring）自噬形成。我们利用LC3在自噬形成过程中发生聚集的现象开发出了GFP-LC3指示技术：无自噬时，GFP-LC3融合蛋白弥散在胞浆中；自噬形成时，GFP-LC3融合蛋白转位至自噬体膜，在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色荧光斑点，一个斑点相当于一个自噬体，可以通过计数来评价自噬活性的高低。汉恒生物已开发出高效的评价用GFP-LC3病毒载体，通过瞬时高效感染细胞，配合活细胞工作站成功评价自噬流。
2）mRFP-GFP-LC3双荧光自噬指示病毒系统
汉恒生物科技（上海）有限公司已开发出用于表达mRFP-GFP-LC3 融合蛋白的病毒产品。mRFP 用于标记及追踪LC3，GFP 的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体，即由于GFP 荧光蛋白对酸性敏感，当自噬体与溶酶体融合后GFP 荧光发生淬灭,此时只能检测到红色荧光。 已多种双荧光病毒系统提供，具体如下：
a）mRFP-GFP-LC3腺病毒系统——可高效感染目的细胞，表达mRFP-GFP-LC3，感染后细胞可在荧光显微镜下实时观察自噬发生过程；
b）mRFP-GFP-LC3慢病毒系统——可以稳定表达持续检测细胞的自噬流检测；
c）mRFP-GFP-LC3腺相关病毒（AAV）系统——最有效的在体自噬流检测工具；
二、自噬检测以及整体服务
1）自噬检测服务
常规自噬检测服务包括western blot检测细胞自噬的水平，优惠提供自噬常规抗体LC3、p62以及beclin1等，我们的研究团队长期为客户提供自噬技术服务，有丰富的自噬研究经验，我们的优势是周期短，质量高；
a）利用Western Blot检测LC3-II/I比值的变化以评价自噬形成。自噬形成时，胞浆型LC3（即LC3-I）会酶解掉一小段多肽，转变为（自噬体）膜型（即LC3-II），因此，LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。（Note：LC3抗体对LC3-II有更高的亲和力，会造成假阳性。方法2和3需结合使用，同时需考虑溶酶体活性的影响。）
b）利用Western Blot检测p62蛋白来评价自噬以及自噬流的强弱:起初自噬所降解的底物被认为是随机的,但是后来的研究表明有些蛋白是seletively降解的,在这些蛋白之中研究的最为透彻的是蛋白p62, p62蛋白水平的多少与自噬流的强弱有着反比例关系)。
2）LC3病毒感染服务
凡购买本公司自噬病毒研究工具，我们承诺免费上门指导细胞病毒感染实验，以确保您的实验效果及安全性，此外我们还会提供腺病毒使用相关资料及文献供您参考；
3）自噬电镜服务
电镜作为自噬检测的金指标，一直是高质量科研论文不可或缺的数据。客户提供样品，我们为其检测细胞或者组织的自噬以及自噬流的水平，并且辅助客户进行数据分析整理，详询汉恒自噬工程师；
由于自噬体属于亚细胞结构，普通光镜下观察不到自噬体的形成，因此，直接观察自噬体需在透射电镜下。Phagophore的特征为：新月状或杯状，双层或多层膜，有包绕胞浆成分的趋势。自噬体（AV1）的特征为：双层或多层膜的液泡状结构，内含胞浆成分，如线粒体、内质网、核糖体等。自噬溶酶体（AV2）的特征为：单层膜，胞浆成分已降解。（autophagic vacuole，AV）
三、自噬研究相关试剂
汉恒生物可以根据您的实验需求为您提供最实用的试剂产品，让您用的放心，省心！
| 产品 | 厂商 | 规格 | |
| 溶酶体抑制剂Hydroxychloroquine （羟氯喹） |
Sigma | 1g | |
| mTOR抑制剂rapamycin | Sigma | 20mM | |
| 自噬抑制剂3-（3-MA） | Sigma | 100mg | |
四、参考文献
1、TRB3 links insulin IGF to tumour promotion by interacting with p62 and impeding autophagic proteasomal degradations；
（2016年发表于Nature Communications，作者：胡卓伟）
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文献和实验重磅综述：年发文量近 10000，自噬领域第 4 版研究指南发布
主要报道了 Atg5 的功能，被认为是哺乳动物分子机制研究的第一环，以及参与克隆自噬标志物 LC3，而且制备了一些 ATG 基因敲除老鼠以及 LC3 转基因老鼠。4、Tamotsu Yoshimori (吉森堡)，大隅良典的弟子Tamotsu Yoshimori 是自噬领域顶尖级的学者之一，特别是在阐明哺乳动物中自噬的机制做出了杰出的贡献。2000 年，Tamotsu Yoshimori 课题组首次报道了鉴定细胞自噬的金标准 —— 关键蛋白 Atg8 的同源蛋白 LC3，同时还建立了检测哺乳动物中
步，合理利用时间很重要。每年的时间节点基本上差不多，以下以 2017 年国自然为例作了说明。中标率约为 21%，即五份标书中，你的标书要 pk 掉其他四份，因此掌握对的方法则是制胜法宝。02 基金申请常用技巧小技巧，可事半功倍基金申请看似千变万化，实质上却有章可循。一个简单的小技巧，却能快速找到捷径。以下是学霸君整理的一些资料，大家在平常科研过程中，也可模仿类似方法，可快速提高效率。课题设计尽管，每个研究领域都有对应的研究热点，但其实，各个领域的课题设计思路均可模仿套用。大约一半的基金是这么设计
有点儿惊悚？别担心，下面要讲述的不是一个恐怖故事，而是在每个人身上每天都发生的故事——自噬（Autophagy）。细胞自噬简单来说就是细胞自己吃自己，通过消化自己内部的垃圾，维持内环境的稳定。看似自取灭亡，实则釜底抽薪。自噬作为细胞重要机制，与个体成长、发育、分化、衰老密切相关，其功能的紊乱往往会导致肿瘤、神经退行性疾病、微生物感染、炎症等疾病的发生。然而，这一重要的现象直到 2016 年日本细胞生物学家大隅良典获得诺贝尔奖才开始得到广泛关注。纵观近年来发表的众多文章，很多疾病都与自噬密切相关
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