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自噬整体解决方案——专业研究自噬相关课题

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      病毒现货工具

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      汉恒生物

    自噬整体解决方案——专业研究自噬相关课题



    自噬作为时下的研究热点,有非常深远的研究意义。汉恒生物经验丰富的自噬研究团队,可以为您提供自噬研究的整体服务,省时,节力,专业。

    一、自噬病毒工具

    汉恒生物有多种自噬病毒研究工具可以提供,便于直接感染目的细胞后直观地观察细胞自噬的整体水平;

    1)GFP-LC3单荧光自噬指示病毒系统

    GFP-LC3病毒系统可高效感染目的细胞,表达GFP-LC3,感染感染后细胞可在荧光显微镜下实时观察自噬的整体水平;

    由于电镜耗时长,不利于监测(Monitoring)自噬形成。我们利用LC3在自噬形成过程中发生聚集的现象开发出了GFP-LC3指示技术:无自噬时,GFP-LC3融合蛋白弥散在胞浆中;自噬形成时,GFP-LC3融合蛋白转位至自噬体膜,在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色荧光斑点,一个斑点相当于一个自噬体,可以通过计数来评价自噬活性的高低。汉恒生物已开发出高效的评价用GFP-LC3病毒载体,通过瞬时高效感染细胞,配合活细胞工作站成功评价自噬流。

    2)mRFP-GFP-LC3双荧光自噬指示病毒系统

    汉恒生物科技(上海)有限公司已开发出用于表达mRFP-GFP-LC3 融合蛋白的病毒产品。mRFP 用于标记及追踪LC3,GFP 的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GFP 荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP 荧光发生淬灭,此时只能检测到红色荧光。 已多种双荧光病毒系统提供,具体如下:

    a)mRFP-GFP-LC3腺病毒系统——可高效感染目的细胞,表达mRFP-GFP-LC3,感染后细胞可在荧光显微镜下实时观察自噬发生过程;

    b)mRFP-GFP-LC3慢病毒系统——可以稳定表达持续检测细胞的自噬流检测;

    c)mRFP-GFP-LC3腺相关病毒(AAV)系统——最有效的在体自噬流检测工具;


    二、自噬检测以及整体服务

    1)自噬检测服务

    常规自噬检测服务包括western blot检测细胞自噬的水平,优惠提供自噬常规抗体LC3、p62以及beclin1等,我们的研究团队长期为客户提供自噬技术服务,有丰富的自噬研究经验,我们的优势是周期短,质量高;

    a)利用Western Blot检测LC3-II/I比值的变化以评价自噬形成。自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),因此,LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。(Note:LC3抗体对LC3-II有更高的亲和力,会造成假阳性。方法2和3需结合使用,同时需考虑溶酶体活性的影响。)

    b)利用Western Blot检测p62蛋白来评价自噬以及自噬流的强弱:起初自噬所降解的底物被认为是随机的,但是后来的研究表明有些蛋白是seletively降解的,在这些蛋白之中研究的最为透彻的是蛋白p62, p62蛋白水平的多少与自噬流的强弱有着反比例关系)。

    2)LC3病毒感染服务

    凡购买本公司自噬病毒研究工具,我们承诺免费上门指导细胞病毒感染实验,以确保您的实验效果及安全性,此外我们还会提供腺病毒使用相关资料及文献供您参考;

    3)自噬电镜服务

    电镜作为自噬检测的金指标,一直是高质量科研论文不可或缺的数据。客户提供样品,我们为其检测细胞或者组织的自噬以及自噬流的水平,并且辅助客户进行数据分析整理,详询汉恒自噬工程师;
    由于自噬体属于亚细胞结构,普通光镜下观察不到自噬体的形成,因此,直接观察自噬体需在透射电镜下。Phagophore的特征为:新月状或杯状,双层或多层膜,有包绕胞浆成分的趋势。自噬体(AV1)的特征为:双层或多层膜的液泡状结构,内含胞浆成分,如线粒体、内质网、核糖体等。自噬溶酶体(AV2)的特征为:单层膜,胞浆成分已降解。(autophagic vacuole,AV)

    三、自噬研究相关试剂


    汉恒生物可以根据您的实验需求为您提供最实用的试剂产品,让您用的放心,省心!

    产品 厂商 规格
    溶酶体抑制剂Hydroxychloroquine
    (羟氯喹)
    Sigma 1g
    mTOR抑制剂rapamycin Sigma 20mM
    自噬抑制剂3-(3-MA) Sigma 100mg

     

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    该产品被引用文献

    [1]Chen S, Lu Z, Jia H, Yang B, Liu C, Yang Y, Zhang S, Wang Z, Yang L, Li S, Li J, Yang C. Hepatocyte-specific Mas activation enhances lipophagy and fatty acid oxidation to protect against acetaminophen-induced hepatotoxicity in mice. J Hepatol. 2023 Mar;78(3):543-557. 

    [2]Li S, Lv J, Li Z, Zhang Q, Lu J, Huo X, Guo M, Liu X, Li C, Wang J, Shi H, Deng L, Chen Z, Du X. Overcoming multi-drug resistance in SCLC: a synergistic approach with venetoclax and hydroxychloroquine targeting the lncRNA LYPLAL1-DT/BCL2/BECN1 pathway. Mol Cancer. 2024 Oct 31;23(1):243. 

    [3]Li S, Xu H, Liu S, Hou J, Han Y, Li C, Li Y, Zheng G, Wei Z, Yang F, Gao S, Wang S, Geng J, Dai H, Wang C. Targeting Lp-PLA2 inhibits profibrotic monocyte-derived macrophages in silicosis through restoring cardiolipin-mediated mitophagy. Cell Mol Immunol. 2025 Jul;22(7):776-790. 

    [4]Ma X, Jia Y, Yuan J, Tang QJ, Gao WC, Zhou GF, Yang RH, Pang W, Zheng CB. Inhibiting cardiac autophagy suppresses Zika virus replication. J Med Virol. 2023 Feb;95(2):e28483.

    [5]Qin T, Li C, Xu Y, Qin Y, Jin Y, He R, Luo Z, Zhao J, Duan C, Lu H, Cao Y, Hu J. Local delivery of EGFR+NSCs-derived exosomes promotes neural regeneration post spinal cord injury via miR-34a-5p/HDAC6 pathway. Bioact Mater. 2023 Nov 28;33:424-443. 

    [6]Luo N, Zhu W, Li X, Fu M, Zhang Y, Yang F, Zhang Y, Chen Z, Zhang Q, Peng B, Li Q, Chen X, Liu Y, Hu G, Peng X. Defective autophagy of pericytes enhances radiation-induced senescence promoting radiation brain injury. Neuro Oncol. 2024 Dec 5;26(12):2288-2304.

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    [8]Zhang J, Wang H, Chen H, Li H, Xu P, Liu B, Zhang Q, Lv C, Song X. ATF3 -activated accelerating effect of LINC00941/lncIAPF on fibroblast-to-myofibroblast differentiation by blocking autophagy depending on ELAVL1/HuR in pulmonary fibrosis. Autophagy. 2022 Nov;18(11):2636-2655. 

    [9]Yan L, Zhu W, Wang M, Zhao R, Zhang G, Guo X, Li C, Wang S, Zhang H, Gao P. OR2T6 modulates autophagy through the PPP3CA-mediated pathways to suppress gastric cancer. Cell Death Differ. 2025 Nov 10. 

    [10]Yan J, Shen M, Sui B, Lu W, Han X, Wan Q, Liu Y, Kang J, Qin W, Zhang Z, Chen D, Cao Y, Ying S, Tay FR, Niu LN, Jiao K. Autophagic LC3+ calcified extracellular vesicles initiate cartilage calcification in osteoarthritis. Sci Adv. 2022 May 13;8(19):eabn1556.

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