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- 细胞流式分析
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- 2026年01月13日
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研载生物
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细胞流式分析
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孔
一、技术简介
流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）是一种对液流中排成单列的细胞或其它生物微粒（如微球，细菌等）逐个进行快速定量分析和分选的技术。其主要特点是：1.测量速度快；2.可进行多参数测量；3.是一门综合性的高科技方法；4.既是细胞分析技术，又是精确的分选技术。经过长时间的发展，流式细胞术已经十分成熟，并被广泛的运用于从基础研究到临床实践的各个方面，涵盖了细胞生物学、免疫学、血液学、肿瘤学、药理学、遗传学及临床检验等领域，在各学科中发挥着重要的作用。
待测样品(如细胞、染色体、精子或细菌等)经荧光染料染色后制成样品悬液，在一定压力下通过鞘液包围的进样管而进入流动室，排成单列的细胞，由流动室的喷嘴喷出而成为细胞液流，依次通过检测区域。流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束，垂直照射在样品流上，被荧光染色的细胞在激光束的照射下，产生散射光和激发荧光。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管接收。光散射信号在前向小角度进行检测，这种信号反映了细胞体积的大小；荧光信号的接受方向与激光束垂直，经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离，形成多个不同波长的荧光信号。这些荧光信号会转化为可被计算机识别的数字信号，在计算机屏幕上显示出来。
二、实验流程
1. 细胞培养。
2. 消化贴壁细胞并离心收集。
3. 重悬细胞，染色。
4. 流式细胞仪检测。
5. 统计结果分析。
三、服务说明及结果
1. 客户提供：细胞株、所需药品及药物处理方式和浓度。
2. 公司提供：流式上机图片、实验步骤、数据分析结果。
3. 实验周期：5个工作日，根据细胞生长情况及实验内容而定。
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联系人：刘经理
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文献和实验. 弃上清，用30ul抗体3-7混合物（1：50 in FAC Sbuffer）重悬细胞，冰上孵育30min。 14. 用200 mL PBS清洗细胞，300RCF4℃离心5 min。 15. 用400 uL DAPI（3 uM in PBS）重悬细胞，用BD LSR II流式细胞仪分析所得细胞。
原代培养细胞，关键是消化，我一般酶液是新配的，要足量啊（又一次还剩三排的时候，一同学把酶液碰到水浴锅，害的我借得酶液，耽误了时间，而且组间数据紊乱，最后浪费细胞和染料，大家要注意保护好酶液啊），这样每次心理都有底，而且放入水浴37度30min，甚至扔到培养箱（不建议采用）升温。 消化前，用温PBS轻洗细胞，一次，然后开始消化，24孔板加400ul酶液（0.25%胰酶和0.02%edta，如果你的edta不好，那么配好就用0.22或0.45um膜过滤），先镜下观察，放入培养箱10
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