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实验问答

28,252,471 科研人在看

问用脱氧胆酸去干扰是直接加进去吗？浓度是多少呢？

dxy_gwrp7ndq

直接加入，脱氧胆酸的纯度为至少96%

1 回答491 围观

问石蜡包埋组织可以提取RNA吗？怎么提取呢？

dxywode

可以。1. 自行准备：无水乙醇、生理盐水、二甲苯及无RNA酶1.5mL离心管。2. 取出析出液和洗涤液，按以下操作：a) 析出液：4.5mL加入25.5mL无水乙醇，混匀；9mL加入51mL无水乙醇，混匀。b) 洗涤液：9mL加入21mL无水乙醇，混匀；18mL加入42mL无水乙醇，混匀。c) 配制好的析出液及洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。作者：清风拂面vv链接：https://

3 回答1152 围观

问如何提高转染成功率?

Guoood

首先跟细胞类型有关，挑选转染效率较高的细胞系。然后用转染试剂及载体用无血清培养基稀释，充分包裹30min，再加到低血清培养基培养的细胞。

3 回答599 围观

问有没有推荐的提取rna快捷高效率的试剂盒?

养点鱼吃火锅

提RNA很快，15分钟-半小时

3 回答582 围观

问多糖多酚植物RNA提取

goonQ2HM

天根的多糖多酚试剂盒挺好用的，就是有点贵

3 回答907 围观

问流式图如何射门，原理是什么

txs900416

一般采用级联门圈门策略，首先圈出目标细胞群体，然后圈出单细胞群体，再通过标记的阴性和阳性选择出目的细胞。例如血液中的T细胞，先圈出PBMC门，再圈出单细胞门，再通过cd45+和cd3+圈出t细胞即可

3 回答1168 围观

问实验有时候会出现误差，应该怎么样避免啊

Lv花开花落

1.多次测量取平均值2.使用精度高的仪器3改善测量方法

4 回答1188 围观

问多聚甲醛固定与丙酮固定的区别？

Amor良

1、这两种方法基本效果都还可以。但要注意多聚甲醛固定时间长的话，一定要防止抗原被醛基封闭决定族。2、其实，丙酮的作用原理是溶解膜磷脂，所有的脂质双层（胞膜、核膜、细胞器膜等）将被破坏，但蛋白和多糖类不受影响。而丙酮固定后不需进行抗原修复，它是一种非交联固定剂。3、多聚甲醛固定对酶类和脂类保护的好，易与蛋白发生交联，所以一般经过甲醛或PFA固定后的标本一般需要抗原修复。

3 回答5525 围观

问污染的细胞怎么处理？可以挽救吗？

Guoood

细胞污染后一般很难救回来，加双抗救回来也很难保证细胞处理的效果，建议每次处理细胞都保证无菌操作，怕污染的话可以在细胞出现污染前加双抗预防。

3 回答1528 围观

问细胞培养时能不能更换培养基的种类？

RC0628

每一细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基，若骤然使用和原先提供的培养条件不同的培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活。

4 回答2850 围观

问RNA提取没有沉淀是什么原因？

wuli猫宁

有时候看不到沉淀，说明你用的细胞或组织太少，RNA比较少，亦或者RNA不低，但看不到沉淀，可能离心时RNA没聚集在一起，散贴在管壁！对于这两种情况，不要灰心，实验不一定失败！取15ul的无RNA水（不要太多），把管壁好好洗洗，RNA就会溶解在水里，一般情况，RT后，也足够做好几次实验了！

3 回答2460 围观

问蛋白质实验相互作用的优势

dxy_gwrp7ndq

蛋白质与蛋白质之间相互作用构成了细胞生化反应网络的一个主要组成部分，蛋白-蛋白互作网络与转录调控网络对调控细胞及其信号有重要意义。

2 回答909 围观

问何为基因工程抗体？？

dxy_gwrp7ndq

目前在临床试验中基因工程抗体约占生物制剂的30%。重组抗体的体积越来越小，或被重新构建成多价分子，或与其它分子相融合，如放射性核素、毒素、酶、脂质体和病毒。重组技术的出现使筛选、人源化、抗体的生产得到革新，并取代杂交瘤技术，从而使以抗体为基础的药剂设计成为可能。

2 回答1569 围观

问Transzol提取RNA

xiaojie17

我也遇到过，老师说是杂质没去干净，或者rna太多了。最后测纯度确实是杂质没去干净。

3 回答403 围观

问为什么PCR测出来某基因表达高，但western测出来低表达

dxy_gwrp7ndq

1.所要检测的目的基因存在选择性剪切体，可以产生成熟的mRNA，但是不一定能翻译成蛋白质。2.做定量PCR的内参基因，最好与做western的内参基因保持一致. 3.注意转膜过程中蛋白质是否转移完全。

1 回答627 围观

问RNA浓度低/质量差的原因及解决办法有哪些？

dxy_gwrp7ndq

得率过低：提取样本过低总量不足或者提取样本过多裂解不彻底；解决方法：可以使用适当质量的组织或细胞进行提取，样本前处理一定要做好，裂解应充分。

1 回答2871 围观

问关于融合蛋白纯化的问题？

Amor良

1、操作尽可能置于冰上或者在冷库内进行。2、不要太稀，蛋白浓度维持在μg/mL～mg/mL。3、合适的pH，除非是进行聚焦层析，所使用的缓冲溶液pH避免与pI相同，防止蛋白质的沉淀。4、使用蛋白酶抑制剂，防止蛋白酶对目标蛋白的降解;在纯化细胞中的蛋白质时，加入DNA酶，降解DNA，防止DNA对蛋白的污染。5、避免样品反复冻融和剧烈搅动，以防蛋白质的变性。6、缓冲溶液成分尽量模拟细胞内环境。7、在缓

2 回答660 围观

问CsCl法从培养细胞中提取RNA时，RNA 的产量低的原因？

Amor良

1 ) 组织或细胞中 RNA 含量偏低：不同细胞或者组织中RNA的丰度不一样，RNA提取量也不一致。2 ) 样品起始量太少或者太多：样品起始量太少，则细胞组织中RNA含量较低，样品过多则超过裂解液的裂解能力，使得裂解不完全，从而RNA得率低。

2 回答755 围观

问RNA提取时，OD260/OD280比值偏低

仗剑走江湖

比值偏低，说明有蛋白污染；补救办法trizol法上清吸取少点300ul即可；异丙醇吸干净；酒精挥发干

4 回答5999 围观

问单细胞测序如何学习分析

彭彭彭文

分亚群，第二步，寻找疾病mαrKer标志物，第三步，功能研究

3 回答874 围观

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