我要登录|
免费注册
|
我的丁香通
- 企业机构：
- 成为企业机构
- 个人用户：
- 个人中心
移动端

大家都在搜

0 人通过求购买到了急需的产品

免费发布求购

发布求购

实验问答

31,561,063 科研人在看

问实验设备仪器，及其起步

迟C迟

提前准备细胞样品试剂：多聚甲醛 70%甲醇丙酮 PBS Triton BSA DAPI染液 DABCO Tris 甘油仪器耗材：离心机细胞培养箱培养板最重要的荧光显微镜另外给你实验步骤：细胞爬片免疫荧光实验步骤第一天：1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次，每次3min；2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min， PBS浸洗玻片3次，每次3min；3. 0.5%Triton

3 回答1051 围观

问为什么HEK293T细胞在玻片上状态很差？

whilt-shirt

293细胞的贴壁性比较差，有可能是细胞老化，也有可能是培养基原因

3 回答2455 围观

问双光素酶报告实验验证靶基因

迟C迟

双荧光素酶报告实验检测灵敏度很跳，酶标仪检测出来的数值就算是重复孔之间差异有时候都是数量级的差别。建议用不一样的实验系统再次验证实验结果。

3 回答2154 围观

问怎样更好的跑出蛋白条带

dxy_gwrp7ndq

1.制胶：先制分离胶，再制浓缩胶，严格按照制胶说明书来就可以了。需要注意的一点是制胶一定要混匀！混匀！混匀！个人经验是每加一种试剂，就混匀一下，直到最后一种试剂加完。对于初学者，还要区分制胶的玻璃板是 1.0cm 还是 1.5cm 的，两者需要的制胶液体量是不一样的。另外，玻璃板一定要洗干净，本人平时都是用洗洁精洗干净然后用水冲洗最后用纯水冲洗，再放在烤箱里烤干并晾至室温。 2.点样：点样的过程

3 回答1147 围观

问mRNA药物在早期研发时，做动物/人体实验之前，需要做细胞水平的检测吗？

迟C迟

需要，看下CNS上相关的研究文章你就知道了。

2 回答1636 围观

问耐药细菌如耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌在培养过程中，是在那一步加入抗生素来保证细菌的耐药性的呢？是在保存液中加入还是液体培养基中？

迟C迟

细胞培养时就要在培养基中加入抗生素了。保存的时候可以直接吸取含抗生素的培养液加甘油保存。

3 回答834 围观

问qPCR半定量不稳定？

迟C迟

首先检查自己实验过程、试剂是否正确。其次换个实验系统再次验证自己的想法。如果不一样的实验系统验证出来的结果都是跟你的想法相反，可能要考虑自己的预期结果是否正确了。

2 回答1694 围观

问为什么格林巴利病人免疫功能有缺陷

whilt-shirt

格林巴利是一急性或亚急性发作慢性损害神经根及中枢神经的脱髓鞘疾病，其病发严重时可侵犯高位脊髓前侧角细胞和脑干神经核以及大脑运动皮质锥体细胞危机生命，属免疫性疾病，大多属病毒感染所致。

3 回答1687 围观

问RNA干扰提取RNA注意事项？

迟C迟

① 使用无 RNase 的塑料制品和枪头，玻璃器皿要消毒，避免交叉污染；使用性能较好的移液器，如 Eppendorf、Thermo 等；② DEPC 有剧毒，小心配制；配制溶液应使用无 RNase 的水；③ 操作人员应戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套；④ 样品应避免反复冻融，否则影响提取 RNA 提取得率和质量；⑤ 若下游实验对 DNA 非常敏感，可用不含 RNase 的 DNase I

3 回答2601 围观

问ELISA实验常用的酶有哪几种？

whilt-shirt

ELISA是利用酶催化反应的特性来检测和定量分析免疫反应。常用的酶主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶。

1 回答1389 围观

问预实验和正式实验结果差别很大

迟C迟

考虑两次实验有什么样品、操作、实验试剂差异。控制环境变量之后，建议提高样本量重新做，没办法，做实验就这样。

3 回答1519 围观

问胰岛素制备实验中，有什么方法可以有效地去除胰脏周围的脂肪?

迟C迟

首先取材的时候要尽量去除脂肪组织。胰岛素制备过程中，首先准备粗制品：将新鲜或冰冻猪胰（牛胰更好）除去结缔组织等杂质，绞碎成冰胰浆。称重量置提取罐中，加入1．5—2．0倍量的酸性酒精溶液，使PH为2．5—3．0，醇含量为70%左右，在温度为13—150度搅拌提取3h,压滤，使浸液尽量滤出。残渣再用上法提取一次。

3 回答1786 围观

问如何提高标记准确率？

迟C迟

请问是什么实验？在医学研究领域，生物标志物的研究思路，一般分为三个阶段：标志物的筛选（Discovery）,标志物的验证（Verification）和标志物的确认（Validation）。标志物的筛选通常需要借助高通量的组学手段，对大规模临床样本进行代谢组学或蛋白组学测定，筛选到具有统计学意义的差异代谢物或蛋白，经过一系列复杂的生物信息学分析，筛选出目标生物标志物。接下来的验证阶段，需要对更小范围

3 回答844 围观

问要测的蛋白的标准分子量在哪个网站上或书里查找呢？

菲菲飞呀飞

NCBI上可以查分子量，还有其它的方也可以查。我推荐几个吧：Genecards: www.genecards.orggentlas:genatlas.medecine.univ-paris5.frUniprot:http://www.uniprot.org

3 回答2070 围观

问酶放大免疫实验技术中，请问放大指的是放大什么呢??? 是指显色，而使得实验结果便于观察吗？但是那荧光标记技术也可以叫做放大技术吗

迟C迟

在酶扩大免疫测定技术中，半抗原与酶结合成酶标半抗原，保留半抗原和酶的生物活性，当酶标半抗原与抗体结合后，半抗原分子上的酶蛋白与抗体密切接触，使酶的活性中心受到影响，酶的活性受到抑制。测定时标本中的半抗原、酶标半抗原与抗体竞争性结合，标本中的半抗原含量越高，加底物后其OD值越高。所以放大的是荧光信号。荧光标记技术并没有放大信号，所以不能叫放大技术。

3 回答1042 围观

问亚硫酸盐修饰过得DNA，回收率总是很低，怎么优化呢？

迟C迟

如果你不想把时间花在摸索上面，用试剂盒转化纯化是个选择。一般用DNA重亚硫酸盐转化纯化试剂盒，可以搜一下，跟着Protocal做，DNA样品未甲基化胞嘧啶转化为尿嘧啶的转化率可高达99%。

3 回答1133 围观

问除了使用不含叶酸的培养基外还有没有其他方法避免微量叶酸干扰

whilt-shirt

叶酸含有1个或多个谷氨酰基，天然存在的叶酸大都是多谷氨酸形式。叶酸的生物活性形式为四氢叶酸。叶酸为黄色结晶，微溶于水，但其钠盐极易溶于水。不溶于乙醇。在酸性溶液中易破坏，对热也不稳定，在室温中很易损失，见光极易被破坏。

1 回答1561 围观

问孵一抗是4度过夜还是37度2小时的效果好？

迟C迟

这两种方法都可以，一般过夜4度是实验时间太长来不及做完，第二天继续，你来得及可以37度两小时。

5 回答7858 围观

问蛋白质样本提纯方面近年来有什么新的进展？

菲菲飞呀飞

膜分离纯化方法超滤是利用离心力或压力强行使水和其它小分子通过半透膜，而蛋白质被截留在半透膜上的过程。由于超滤过程中，滤膜表面容易被吸附的蛋白质堵塞，以致超滤速度减慢，截流物质的分子量也越来越小。所以在使用超滤方法时要选择合适的滤膜，也可以选择切向流过滤得到更理想的效果。目前超滤方法研究工作主要集中在膜材料选取方面。潘巧明[4]探讨了大豆蛋白浓缩的工业化生产中，各种条件对聚矾中空纤维膜性能的影响。

1 回答833 围观

问免疫层析胶体金定量试纸如何确定加样量

whilt-shirt

胶体金试纸条胶体金试纸条一般由样品垫、金标垫、层析膜、吸水垫四部分组成。定量的胶体金试纸是通过抗原抗体复合物反应显色，然后再根据灰度值通过拟合的线性方程（灰度和浓度的二元方程）求出灰度对应的浓度值，即检测结果。

2 回答2243 围观

关于丁香通

公司信息

个人用户

企业机构

无忧采购轻松科研

提问

扫一扫

领取干货资料

反馈

TOP

打开小程序