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细胞培养中血清沉淀对细胞有何影响?
bamboopiggy
血清沉淀问题不大,要是怕有影响,可以把沉淀离心出来,不要
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问
本人培养的是Yts细胞,为什么会出现传代2-2次后出现许多细胞碎片并且状态越来越差,长得很慢(没有污染)?
未来9
细胞碎片多,生长状态不好,可能是你吹打过多或者多次吹打导致碎片,可以加大培养基血清浓度,降低离心速度养两代试试。碎片一般会离心出去
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问
放线菌中色素的分离大概需要多少色素提取物
天一湖医者
色素0.15g溶于50ml水中就可以。
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问
半干转显示 no detected 是什么原因?
天一湖医者
检测金属丝,是不是洗的时候断了? 联系厂家工程师咨询是最专业且最快的方式。
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问
不同部位的细胞的分裂速度一样吗?
bamboopiggy
不一样啊,有的快,有的慢,有的长长就不长了
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问
细胞种到六孔板后生长不均匀
s1223
铺板前细胞一定要涡旋混匀,混匀后缓慢加入,一定一定要慢,之后慢慢转移至培养箱,动作幅度要小,一定一定要小
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问
细胞有时候长了四天了还没长满的原因是什么
bamboopiggy
看你初始铺板的密度,还有你细胞的状况。这个不能看长几天。
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问
干细胞在培养瓶里一般4小时左右可以贴璧,8小时完全铺展,做迁移测试时放多长时间合适呢?
天一湖医者
一般认为24h为细胞的一个周期,在选取合适的时间点(6,12,24h)检测划痕宽度时,最好不要超过细胞一个周期的时间;③ 如果要单纯考虑细胞迁移,可以先用丝裂霉素(1μg/ml)处理1h,抑制细胞的分裂。
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问
细胞摄取实验是不是只有在做载抗癌药物时才需要做的呢?若所做的不针对癌细胞,是否可以不做细胞摄取实验呢?
bamboopiggy
这个取决于你要说明什么问题吧?如果你要说明你细胞基因的改变,会影响某种物质的摄取,你当然要做摄取实验啊。
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问
如何提高提取RNA纯度,避免提取过程中的酚残留?
bamboopiggy
酚与氯仿均起到变性的作用。酚的变性能力强于氯仿,但酚与水有一定的互溶,因此酚抽后,除可能损失部分核酸外,水相中还会残留酚,而酚的存在将对核酸的酶反应产生强的抑制,因此在操作中可单用氯仿作变性剂、也可用酚/氯仿混合变性,也可用单一酚作变性己,但用单一酚后在有机溶剂沉淀时一定要用氯仿重抽提。
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问
siRNA导入细胞有哪些方法,哪种最好?
bamboopiggy
1取决于你的实验目的,细胞还是动物2.要看你要导入的是什么细胞?贴壁细胞一般,用化学转染,悬浮细胞用电转的多。生殖细胞用显微注射,动物可以用载体导入。
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问
同种组织的两种细胞直接共培养
bamboopiggy
贴壁细胞一般用DMEM高糖,悬浮细胞一般用1640,两种细胞直接共培养的培养基可用DMEM高糖,因为DMEM高糖的营养成分比1640多。培养两种细胞的比例需要你做预实验确定,一般从1:1开始,当然 你可以评估一下它们在组织中的分布比例。
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问
由一个单克隆细胞分裂来的CHO细胞,为什么有的大小不一?如何控制细胞粒径,避免其过大?
dxy_3xid5eh3
单克隆细胞也会随着培养时间的增长确实是会产生一些变化,也会存在细胞个体之间的差异,只是相对pull的细胞来说差异更小。可以通过流式分选的方法进行一定粒径的分选。
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问
贴壁细胞传代时候怎么控制胰酶的量呢
Keven轩
一般贴壁能力正常的细胞低浓度胰酶用1mL即可,若贴壁能力强可以增大胰酶浓度或用量
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问
贴壁细胞培养应几次换一次培养基?
Keven轩
如果是293T等增殖速度较快的细胞就不需要换了,直接传代即可。如果增殖速度慢,那么一般一天一换液
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问
条件培养基的离心纯化问题
Eason老歌迷
s2结束后,收集培养基上清液,并离心,过滤,即可得到条件培养基
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问
结直肠癌元代细胞培养
Eason老歌迷
一,操作前就应该提前准备好所有实验所需物品,以减少走动,二,操作时,试剂用完之后,及时盖上盖子,移动的时候尽量不要从开口容器上经过。三,冻存细胞时冻存管盖子需拧紧。等反正无菌操作的原则有很多,我只是提了实验中的我经常疏忽的小点。
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问
组织细胞取材后如何稳定
dxy_bz3louvw
应该提前准备好无血清培养基,待组织离体后直接放入培养基,减少等待时间,在培养皿中进一步分离纯化(弃掉多余组织),然后再进行后续操作。
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问
如何计算细胞培养密度
Keven轩
可以取一定量含有细胞的重悬液进行梯度稀释后上C6流式器进行计数
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问
如何预防细胞培养中黑点的产生?
Keven轩
使用质量较好的胎牛血清,并且加入细胞培养时向培养液中加入抗生素防止污染
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