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问
MCAO模型,8周年龄的成年小鼠(C57)线栓插多深,从颈内外动脉分叉处算的话?
bamboopiggy
大概1cm,但是主要注意手的感觉,轻缓推进,直至感觉到阻力为止。
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问
求教电泳条带亚基含量分析软件
bamboopiggy
不在marker上没事啊,只要组间比较有差异就可以,image J好用的,实在不行,可以用ps读灰度值
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问
提组织RNA
bamboopiggy
你的od值,是260/230吗?如果不是,建议看一下260/230,这个值在1.8左右才好,感觉就是你测的rna的浓度虚高,导致内参CT值偏高。
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问
新冠核酸检测
天一湖医者
一是严格检测资质准入。 二是严格检测质量控制。 三是不断优化技术规范。 四是重点加强第三方检测机构监管。
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问
跪求!C2C12分化的马血清大家用的都是什么呢
bamboopiggy
买不到,就找人借吧,西格玛的我们也用过,是可以的。反正要买进口的,国内的实在无法判断能不能用。
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问
细胞六孔板培养求助
bamboopiggy
你细胞铺的不匀,边缘细胞太多了,时间长了,就挤死了
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问
4kb载体与3kb片段连接一直不长菌落
bamboopiggy
你热激后加的是空白的lb吗?不是带抗性的吧?如果你师姐能做成来,至少证明片段什么的没问题,那就考虑是什么液体加错了。
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问
关于可变剪接结果图
汤姆卜丽波
是指片段中具有或不具有14位可变剪接体
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问
细胞迁移相关的信号通路有哪些?
bamboopiggy
跟肿瘤发生相关的通路,都会和侵袭迁移有关系。你要确定你想研究哪个。
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问
干扰片段在室温下放了24小时,还能用吗
汤姆卜丽波
干粉的话还可以,如果已经配成溶液就不能用了
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问
PCR问题,求助一下?
bamboopiggy
先确定你的primer正确,然后试着降低annealing temperature试试
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问
多重PCR条带问题?
bamboopiggy
非特异性产物?条带大,是不是因为模板量大啊?
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问
为什么出传代的细胞种皿总是生长不均匀?
迟C迟
1.尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶润洗一遍(25cm2培养瓶或6孔板),弃掉胰酶,37度消化2-3分钟或室温消化5min左右,镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够,延长消化时间。我见过有些刚进实验室的师弟师妹,一上来就加1-2ml胰酶,结果细胞团大片脱落,虽然有后续吹打步骤,但我觉得效果不佳。至于难消化的细胞,怎么掌握分寸,还待自己摸索
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2227 围观
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问
四联抗生素C57伪无菌小鼠构建
bamboopiggy
看参考文献,有人用的是灌胃的方法,你如果要小鼠喝的话,建议每天换液,因为抗生素也有个降解的时间啊。
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5128 围观
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问
小鼠流式th17/treg具体步骤?
迟C迟
1、在每个流式上样管中加入100 µl准备好的细胞悬液,细胞数约为1x106个.2、按照细胞表面抗原染色方法标记表面抗原。根据说明书加入CD4和CD25抗体100 µl体系中使用0.125 µg FITC anti-mouse CD4,0.06 µg APC anti-mouse CD25抗体。最好根据这些试剂详细的说明书操作。4 ℃孵育30 分钟。孵育表面抗体之前加入Fc受体阻断剂。 3、用预冷
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问
Southern Blot酶切电泳
迟C迟
Buffer看着跑到头了,样品就很容易跑出去,还是换成长胶,电压低一点慢慢跑,注意不要跑出去。
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问
组织切片荧光双染,DAPI染出来细胞空洞
天选打工人162h
设置了n多的对照组,排除了DAPI的问题,组织自发荧光淬灭剂A液的问题,打孔的问题,封闭的问题,预测是第二天某一步骤的试剂出了问题,等明天的结果
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问
大质粒转染
迟C迟
电转或者化转都试试吧,哪种转进去长出来就行,注意验证。
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问
非变性蛋白电泳,植物总蛋白提取液buffer配方是什么呀
迟C迟
蛋白质提取液:300ml1、1Mtris-HCl(PH8) 45ml2、甘油(Glycerol)75ml3、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinylpolypyrrordone)6g
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问
非变性蛋白电泳,植物总蛋白怎么提取呀?
迟C迟
一、植物组织蛋白质提取方法 1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。 2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上静置(3-4小时)。 3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃ 4、提取上清液,样品制备完成。 蛋白质提取液:300ml 1、1Mtris-HCl(PH8) 45ml 2、甘油(Gl
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