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问
蛋白质胶总是凝的很慢,凝的不好怎么回事
高山云初
过硫酸铵一定要现用现配,时间久了就会造成不凝.这是最常见的不凝的原因
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问
qPCR的Ct值可被接受的区间是多少?是15~30吗?
粥辰辰辰辰
qPCR的Ct值可被接受的区间是15~30
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问
如果skyline锁定的所有离子对均不出峰,该怎么锁定目标离子对?
高山云初
在碰到样品没有出峰的情况,首先考虑是否是因进样浓度太小,运行时间不够,仪器和色谱柱故障,样品是否降解变质,检测器(检测波长)的选择是否准确等问题导致的。如果排除上述问题,样品仍未出峰,则很有可能是样品在固定相上保留太强,这样可以先调整流动相的洗脱能力,增强对化合物的洗脱,或者更换更合适的固定相,如反相C18换成碳载量低一些的C18或者短碳链的反相柱如C8等。
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问
高效液相色谱用于分离酶解后的蛋白,还需要纯化吗?
sswei
高效液相色谱用于分离酶解后的蛋白,还需要纯化
3 回答
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问
大小分子蛋白各自的电泳胶浓度如何选择? 蛋白marker大分子条带降解原因? 蛋白样本跑胶时出现笑脸条带什么原因?
高山云初
微笑是因为你灌胶的时候冷却不均匀,中间部分冷却不好,导致凝胶中的分子有不同的迁移率所致
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问
请问各位这是什么原因呢?转膜后样品孔道也有maker,是加样的时候飘样了吗?
此用户已注销
1、loading buffer的甘油太少,时间放置过长,浓度不对2、电泳液放置时间过长,浓度太高3、胶没配好或者把梳子用力不均匀,上样孔有凝胶
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问
请问验证第一次单交换是用转化子扩培后得到的单菌落吗?验证引物设计在同源臂上,出现两条带再进行蔗糖筛选
粥辰辰辰辰
验证第一次单交换是用转化子扩培后得到的单菌落,验证引物设计在同源臂上,出现两条带再进行蔗糖筛选
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问
请问我往商品化灭活疫苗加入自己纯化的IFITM1蛋白作为佐剂,来免疫14日龄左右的小鸡,这个每羽份的加入量应该多少比较合适呢
周末也要努力呀
建议设置浓度梯度和更加保险,别人的不一定适合你的实验环境。加减15左右的区间
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问
C2C12细胞培养增殖和分化培养基都用的马血清吗
sswei
C2C12细胞增殖培养基:高糖DMEM+10%FBS+1%PSC2C12细胞分化培养基:高糖DMEM+2%马血清+1%PS
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问
大鼠和小鼠哮喘模型的构建。
周末也要努力呀
可以做老鼠肺功能检测验证一下即可
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问
用TGF-β1诱导纤维化,研究内皮细胞发生内皮间质转化,选用10ng/ml的TGF-β1,应该诱导多长时间?
周末也要努力呀
6小时以上,可以做一个时间梯度
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问
电泳时样品没有溢出到其他泳道,胶进行考马斯亮蓝染色后,各个泳道蛋白都连在一起了,而且泳道越来越宽,为什么呢?
balalaLy
上样量太大了,蛋白向两边溢了。
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问
大肠杆菌中菌上清液中高效液相色谱测天冬酰胺的含量
sswei
1). 先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um。2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3). 正常情况下,仪器先用甲醇冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂,则要次重蒸水冲洗10-20分钟,直至色谱柱中有机相冲净为止) 。4). 般情况下,流动相冲洗20-30分钟后,仪器方可稳定,重要的是仪器基线走
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问
化学需氧量测定 快速消解 分光光度法
土井挞克树
是的,利用快速消解来去除水中的氯离子
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问
跑SASPAGE胶,发现条带比预测大小大20kDa,目的条带10kda
静心观照
1.确定蛋白是内源的还是外源的,如果是外源蛋白是不是全长序列;2.SWISSPROT 数据库查询该蛋白是否有其他isoform ;3.SWISSPROT 和文献查询蛋白质是否有剪切活化,剪切活化造成蛋白变小;4.确定蛋白质是否是二聚体或多聚体5.NCBI和SWISSPROT 查询蛋白质表达后是否有修饰,如有修饰会导致蛋白质增大如果除了上述 5条,还是没找到问题在哪里,那就回过头看看是不是预测不准或
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问
请问热酸蚀可以用锥形瓶吗
feixue7758527w
是的,可以用锥形瓶的,大多数锥形瓶都是耐酸碱的。可用的。
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问
做wb蛋白组学分析,大家对于相同kd是直接洗脱后重敷显影还是另外做多一条?有方案的大神可以分享一下
静心观照
相同KD的蛋白,如果完全重合做好多做一条或重新跑。当然,也可以洗脱一下重新孵育新的抗体,后者可能会出现前一个抗体没有洗掉,或者连同蛋白完全洗掉的情况。
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问
噬菌体展示做ELISA结果有疑问,求求救命
huarenqiang5
你的这个情况建议首先排除细菌或支原体污染。
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问
qPCR相关实验问题
静心观照
是荧光值阈值线,这个是可以取消的,设置一下就可以了
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问
【求助】酶切连接构建的载体测序结果存在突变
dxy_tdv6gc82
请问你解决这个问题了吗 我也遇到了🥲
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