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        流式分选特定B细胞 求助!

        相关实验:用流式细胞术检测活化的血小板

        user-title

        红豆西米露嘻嘻

        打算用流氏分选单个B细胞,已经免疫好的小鼠,取脾脏悬液去做流氏,想筛选出针对A多肽,B多肽,C多肽都能反应的B细胞,但染色具体用哪些抗体染色不是很懂,具体筛选方案不太有思路。我知道,先设门圈出单个细胞,然后是活细胞,淋巴细胞anti-CD45,然后然后b细胞anti-CD19,后面就不太了解了。就大佬们给点建议!!!

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        4 个回答

        user-title

        dxy_54fklm8q

        有帮助

        请问一下楼主最后永什么抗体分的呀

        user-title

        dxyc42u

        有帮助

        流式对抗体要求还是比较高的,建议买进口的

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        对于您的实验,您需要选择适当的抗体来对B细胞进行筛选,以便选择出能够针对多个多肽的细胞。

        一种策略是使用针对A多肽,B多肽和C多肽的荧光标记抗体进行染色。这种方法需要您的目标多肽已经被免疫小鼠的B细胞所识别。您可以使用荧光染料标记的抗体来识别这些特定的细胞。例如,您可以使用荧光标记的抗CD19,抗IgG1和抗IgG2a抗体来选择B细胞。这些抗体可以用于荧光激发分光光度计或荧光显微镜。

        另一种方法是使用多重荧光染色进行筛选。您可以使用多个抗体来识别B细胞表面的不同标志物,这样可以对B细胞进行更准确的分类。例如,您可以使用抗CD19和抗CD45R/B220的荧光标记抗体来对B细胞进行筛选。

        需要注意的是,不同抗体对细胞的染色效果可能会有所不同,您可以尝试不同的抗体组合来优化您的筛选方案。同时,您还需要对筛选到的细胞进行进一步的验证,以确保它们对您的目标多肽具有特异性。



        user-title

        土井挞克树

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        接下来用流式分选,然后做免疫荧光。

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