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        流式检测血小板活化实验方法和步骤。

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        不爱种地的农民

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        3 个回答

        user-title

        静心观照

        有帮助

        血小板活化检测靶点:CD41 或 CD61,CD62p,CD63;

        血小板活化检测标本:柠檬酸钠抗凝全血;

        推荐抗体组合

        管号 FITC PE

        1 Mouse IgG1 Mouse IgG1

        2 CD41或CD61 CD62p

        3 CD41或CD61 CD63

        检测步骤

        抽取静脉血 2 mL,柠檬酸钠抗凝。血液采集后 1 小时内进行实验;

        注:抽血时尽量不要用止血带,以免引起人为活化。

        <在流式管内加入 100 uL PBS 和 5 uL 抗凝血;/li>

        加入适量的抗体和同型对照;

        室温、避光染色 15 分钟;

        加入 1 mL PBS,上机检测。

        结果判断

        正常人:血小板(CD41 或 CD61 阳性群)的 CD62p 和 CD63 表达率均在 5%以内。

        血小板活性增强者:血小板(CD41 或 CD61 阳性群)的 CD62p 和 CD63 表达率均超过 5%。

        user-title

        高山云初

        有帮助

        1.采血10分钟内,用移液管将50 μL ADP溶液移至12 × 75毫米的试管中。

         

        2.加入0.45 mL全血。轻轻地旋转搅拌。

         

        3.室温(20°C至25°C)孵育2分钟。

         

        4.立即染色或固定。 固定 染色前用多聚甲醛固定血液可抑制血小板自发激活。

        user-title

        小小翻车鱼

        有帮助

        下面是流式检测血小板活化实验的一般步骤和方法:

        1. 准备样品:采集血液样本,离心去除红细胞,得到血浆。如果需要,可以从血浆中分离血小板。

        2. 表面标记:使用特定的抗体(如CD62P、CD63、CD69等)对血小板进行表面标记。这些抗体可以识别活化血小板上的特异性抗原,通过荧光标记抗体,可以让流式细胞仪检测到它们。

        3. 染色:如果需要检测血小板的形态,可以采用染料(如Rhodamine 113)染色。这可以帮助区分不同阶段的活化血小板。

        4. 数据收集:使用流式细胞仪收集数据。流式细胞仪可以测量荧光强度和形态特征,从而计算出不同活化状态的血小板的百分比。

        5. 数据分析:分析收集到的数据。根据荧光强度和形态特征,可以确定活化血小板的百分比。此外,还可以分析不同活化状态的血小板的分布和数量。

        6. 结果解释:根据实验目的和数据分析结果,解释实验结果。例如,可以确定活化血小板的百分比,研究不同刺激物对血小板活化的影响,或评估特定疾病中血小板活化的异常。

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