实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问关于毕赤酵母电转化验证的问题

Eason老歌迷

如果挑的菌落都是500bp的话，那就是你pcr跑胶回收的时候切错条带了，或者你的目的片段中有你选择的限制内切酶的酶切位点，被切断了。

1 回答559 围观

问论文投稿图片要求

bamboopiggy

请问什么是大型期刊，什么是小型期刊呀？是有的杂志是A4大小，为大型的，有的是B5大小为小型的。为什么双栏是84mm,单栏174mm还更大呢?双栏指的是两列，所以单列市84，单栏指的市一个页面上就一列，所以市174森林图是line art

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问请问toxicity annotation是什么意思啊？怎么翻译比较准确呢？

bamboopiggy

字面意思是：毒性注释，你最好把整句话都贴上来

3 回答212 围观

问求助帖：slot blot 和dot blot的区别和原理

Eason老歌迷

斑点杂交dot blot是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜（或尼龙膜、NC膜）上，用已标记的探针进行杂交，洗膜（除去未接合的探针），放射自显影，判断是否有杂交及其杂交强度，主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测。狭缝斑点slot blot，也是广义dot blot的一种。

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问转染两个重链质粒进细胞会怎样？

Eason老歌迷

两种质粒混了没有影响。利用同一复制系统的不同质粒不能在同一宿主细胞中共同存在，两种质粒混了没有影响，只是不相容。利用同一复制系统的不同质粒不能在同一宿主细胞中共同存在，当两种质粒同时导入同一细胞时，它们在复制及随后分配到子细胞的过程中彼此竞争。在一些细胞中，一种质粒占优势，而在另一些细胞中另一种质粒却占上风。当细胞生长几代后，占少数的质粒将会丢失，因而在细胞后代中只有两种质粒的一种，这种现象称质粒

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问请问，一个质粒里有2个CMV启动子，那它后面的基因都可以表达吗？

bamboopiggy

对都会表达，但是我感觉其中一个的cmv启动子可能在抗性基因上。

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问有没有做星形胶质细胞实验的呀？交流一下经验呀

Eason老歌迷

缺氧时间一般需要摸索，不同的细胞对缺糖缺氧的耐受不一样，我们以前做原代胶质细胞可以2-4h，但是传代胶质瘤细胞BV-2可以12h都没什么太大影响，所以建议OGD不同时间测个MTT，摸索下最佳的条件。

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问huvec血管形成实验求助

Eason老歌迷

具体的方法如下，huvec细胞细达到80%汇合度后准备消化，一般过夜培养后的细胞状态更佳，收集细胞进行计数，并按照需求梯度稀释调整细胞的浓度，请一定保证细胞状态完好。24孔板加入200ul的huvec细胞悬液，浓度约为12-20万个细胞,建议做复孔；细胞加入后不应该移动培养板，放入37度孵箱约4小时左右即可进行观察血管是否形成。一般在15小时后成管会开始缓慢皱缩凋亡。第一个问题，在你细胞加入后，你

2 回答1339 围观

问黑色素对D-半乳糖衰老小鼠的抗衰老作用

Eason老歌迷

如果你拿生理盐水当对照组，你就用生理盐水来配比药物。

2 回答434 围观

问肺炎链球菌毒力基因pilus islets的中文名称是啥？

bamboopiggy

按照英文硬翻译是菌毛编码的致病岛，你可以找本病原细菌学看看。

2 回答271 围观

问毛细采血管需要灭菌吗

bamboopiggy

毛细管采血一般不需要灭菌，如果要灭菌，可以在容器中加入一点点水，然后高压灭菌

3 回答686 围观

问TCGA差异基因结果与细胞qP表达结果相反怎么办

bamboopiggy

tcga比的使癌和癌旁，你细胞系怎么比？有正常和肿瘤么？当然肿瘤里面高的基因，在癌细胞中不一定高，你可以多找几个癌细胞

2 回答897 围观

问求助！请问有人分离出较纯的腹腔间皮细胞吗

Eason老歌迷

可以参看1999年第19卷第一军医大学学报的这篇文献“人腹膜间皮细胞的分离培养”，讲解的很清楚。

2 回答222 围观

问求问:可以用lees指数将小鼠肥胖分为轻中重吗？有没有标准呢?

Eason老歌迷

可以。Lee's指数就综合反映了体重与体长的比例关系，能较好的反映大鼠/小鼠的肥胖程度。

1 回答1459 围观

问羊毛硫肽类化合物跟硫肽类化合物是一种吗？硫链丝菌素（thiostrepton）是羊毛硫肽类化合物吗？

Eason老歌迷

是一种，可以看看这篇文章”羊毛硫肽类化合物(Lanthipeptide)生物合成新进展”里面讲的很清楚。硫链丝菌素（thiostrepton）是羊毛硫肽类化合物。

1 回答439 围观

问请问大家知道ncf后缀的文件用什么可以打开吗？

bamboopiggy

好像那个播放器叫ZzFlash ncf 1.1.0.2.exe,必须得用微软的视窗操作系统看。

2 回答1034 围观

问支原体培养

Eason老歌迷

解脲脲原体(UU）是耐酸不耐碱的，UU培养的原理是在于其菌体中含有脲酶，而UU培养基中含有尿素，UU的生长需要其本身的脲酶分解尿素益提供其自身生长所需要的营养物质，UU培养基中含有指示剂酚红，由于尿素被分解释放出氨从而使培养基变碱而使培养基由黄变红，但是这种红是一种清亮的红色，透明澄清无浑浊，UU其适宜的PH值为6.2-6.5，由于尿素分解产氨是PH上升，UU在PH值大于7的条件下会迅速死亡，因此

2 回答701 围观

问流式细胞仪平均荧光强度

Eason老歌迷

机器不一样，单位不一样，所以结果也不一样，可以参考两个机器的说明书。

1 回答240 围观

问关于coip银染后送质谱的问题

balalaLy

这个银染做得不好，建议重新做一次。用梯度胶跑开一点，上样量不要太大，显影液和敏化液的量可以适当调整。

2 回答1700 围观

问想问一下有人做过灌注后心脏切片吗

bamboopiggy

小鼠死了以后，心脏的改变和活体不一样啊，活体取脑最好使做心脏灌注的。灌注后的心脏单纯切部分切片没问题，但是切四腔心，可能有问题。

3 回答403 围观

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