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问
用Autodock之前需要准备哪些知识
你好几和户
需要安装autodock 和autodock tools,都是免费的软件,网上搜索一下按提示进行安装即可。准备蛋白和小分子的pdb文件PDB蛋白数据库网址https://www.rcsb.org/PubChem小分子数据库https://www.pubchem.ncbi.nlim.nih.gov/准备坐标文件---AutoGrid---docking---分析对接结果---analyze
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问
小鼠支持细胞TM4转染
Eason老歌迷
推荐你看看这篇文献”小鼠雄激素受体真核表达载体的构建及稳定转染TM4细胞系的建立与鉴定”,张晓燕教授写的。
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问
养细胞为什么会出现这种碎片一样的东西(HCT116
Eason老歌迷
可能是你的传代时机选的不好,细胞老化成细胞碎片。可能是传代垂悬没混匀,细胞成团生长。
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问
跑了大半个月,IRF3只跑出过一次,这是抗体有问题吗?内参还算可以?
Eason老歌迷
没看出来有条带,你转完膜封闭可以用丽春红染色看一下有没有条带,或者你延长一下封闭时间,背景太脏。
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问
菌落计数平板pca为什么会出现连片的菌落
你好几和户
那说明你涂平板时菌液浓度高了,要继续稀释。
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问
targetscan搜索后Pct是N/A是怎么回事?
你好几和户
数据没出或者没填全,出现不能获得数据的提示
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问
小鼠耳蜗基底膜铺片染色
Eason老歌迷
哇,染的很好看!谢谢分享。学习到了
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问
我的目的带很弱,如何加强?
此用户已注销
这种情况下可以加定量或者一抗浓度。
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问
番茄红素标品用什么流动相跑,用的c18反向柱
你好几和户
色谱过程中携带待测组分向前移动的物质称为流动相。 与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的另一相。 1、可以用丙酮。2、有的反相流动相还用DMF和乙醚。3、 主要是看丙酮对你的分析有没有影响流动相为水或缓冲液,比如样品的溶解,常加入甲醇、异丙醇、乙腈、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。
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问
有什么办法可以提高蛋白提取浓度?
默然前进前行
用水提取蛋白质时,还应考虑盐的浓度、PH、温度等因素。 如:PH 溶液PH影响蛋白质的溶解度和稳定性,蛋白质提取溶液的PH应首先在保证蛋白质的稳定范围,选择偏离等电点两侧的某一点,以增大蛋白质的溶解度,提高提取率等。
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问
脑室注射miRNA或siRNA微量注射器需要提前处理吗?
Eason老歌迷
需要提前处理!rna遇到rna酶直接就降解了。你可以先用外源RNA酶清除剂洗,然后在用无核酸酶水清洗,密封好,下次备用。
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问
免疫共沉淀的图怎么看啊
冷泉港蛋白
一、免疫共沉淀的机理:1. 首先证细胞内存在这两个蛋白2. 阳性表明可能存在互作(实验组)3. 排除非特异吸附(对照组): 蛋白a b没有非特异吸附到磁珠和抗体的恒定区 二、免疫共沉淀研究的几个层次1. 蛋白a和蛋白b是否存在互作(图上)2. 二者的关系,进行过表达(图下Flag)或抑制表达相关实验3. 是直接互作还是间接互作
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问
求助:制备了一个纯化柱,请问DBC怎么计算
Eason老歌迷
要用蛋白的纯品。C0是指穿透X%时收集的穿透样品的浓度。
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问
求助:用了新的蛋白上样缓冲液后,SDS没有条带
冷泉港蛋白
需要知道上样缓冲液各组分及其浓度和特点,undefined上样含有4 %的sds,四度会结晶,需要恢复室温并混匀后使用。你加的上样缓冲液估计不含或含有很少的sds,不足以解离细胞或提供蛋白前进所需要的负电荷了。
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问
求助|flag-beads是自带抗性吗?
bamboopiggy
对,flag-beads是自带flag抗体的beads,你只要binding完了,煮了以后,要先用flag的一抗去杂,加二抗显影就可以。
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问
胰蛋白酶分子印迹洗脱相关求助?
冷泉港蛋白
一、如果要从sds-page胶条拿到蛋白:蛋白与胶条之间相互作用力很弱,也不是离子相互作用,氯化钠作用不大。方法1.切胶,研磨,溶解。参考 蛋白胶条质谱鉴定的前处理方法2.进行横向电泳二、如果要从wb膜上拿到蛋白,就比较困难了,得考虑作用力了
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问
阻断ELISA
yaonan120
1.是不是阻断剂效果不好呢2.这种情况可以说是灵敏度的问题吧,标记那边是否可以降低标记量。3.降低空白,稀释液中加点BSA可以降低空白。希望可以帮到你
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问
竞争ELISA和阻断ELISA的区别是什么呢?
天一湖医者
竞争ELISA和阻断ELISA免疫抗体检测方法都可对小反刍兽疫病毒免疫抗体进行检测,在同一块96孔酶标板中,竞争ELISA和阻断ELISA可以分别检测43份、93份和90份样品,但是竞争ELISA的操作相对比较复杂,且用时较多;阻断ELISA的操作简单,用时少。如果同时检测100份样品,竞争ELISA和阻断ELISA的准确率分别为85%、88%和95%,因此阻断ELISA的准确度和重复性均高于其竞
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问
镍柱纯化,bufferA冲不出来杂蛋白峰
Eason老歌迷
是不是色谱柱的问题,色谱柱对样品具有很高的选择性,如果在气相色谱仪使用中选用了与所进样品极性不相符的色谱柱,或选用色谱柱与样品会发生反应,则有可能造成样品无法正常到达检测器,从而无法出现相应的样品峰。色谱柱选用不合适原因造成的不出峰,可以通过选用与样品相适应的色谱柱解决。
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问
请问多高浓度的SDS,Triton100,NP40可以导致细胞核破裂?
bamboopiggy
不建议用sds,因为里离子型去垢剂,裂解强度比较大,一般建议用triton100 ,或np40。NP40 0.0.5% 作用5min,可以裂解掉细胞膜。
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