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        阻断ELISA

        相关实验:ELISA 实验

        user-title

        QBD0Z

        想建立阻断ELISA,优化条件的时候,阳性OD值跟阴性相当,没有被阻断,不知道什么原因,求解,感谢。单抗用间接ELISA检测过,效果还挺好的。

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        3 个回答

        user-title

        冷泉港蛋白

        有帮助
        1. 阻断elisa原理:

        该方法是基于基因工程和单克隆抗体发展起来的ELISA方法,其原理是在酶标板中包被通过基因工程得到的猪瘟病毒保护性抗原蛋白,然后加入待检血清与包被的抗原孵育,洗板后加入针对包被蛋白的酶标单抗再次孵育,后加入底物显色,通过OD值来判定猪瘟抗体的效价。

        2.在阻断elisa里面有两个变量,包被的抗原和酶标抗体。

        检测的结果不好,可能是抗原,也可能是酶标抗体的问题。如果有商业化的试剂盒,做个交叉验证,确定下是抗原还是酶标抗体的问题。

        你的抗体用间接法做的好,阻断不好,也有可能。两者的反应模式不一样;你的抗体可能不是优势位点;也可能人家用的是多抗

        user-title

        yaonan120

        有帮助

        1.是不是阻断剂效果不好呢2.这种情况可以说是灵敏度的问题吧,标记那边是否可以降低标记量。3.降低空白,稀释液中加点BSA可以降低空白。希望可以帮到你

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        你说的结果:阳性OD值跟阴性相当,没有被阻断。不知道你所谓的高是相对什么而言的高,阴性一般是相对数值,选用的波长和抗体的滴度都可能使数值偏高,关键是看你的阳性和阴性的比值是怎么样的,一般要大于2.1才算是正常的阳性。

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