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问
求助:免疫组化染色全是一片红色?
府宅
组织变干一下子染太多片子的时候,容易出现这种情况。解决的办法就是不要贪多嚼不烂。一次少染几张。还有就是试剂充分覆盖组织,超出组织边缘2 mm。然后用PAP笔在组织周围画一个圈圈,把修复液圈在里面。避免修复液流走。圈圈应该距离组织边缘3-4 mm。 浸泡时间过长切片在缓冲液或修复液里面浸泡过一夜,也会引起杯具。这都是偷懒的做法。但是有时候也是可以偷一下懒的。独门秘技就是4°C冰箱。只要把容器放在4°
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问
如果流式细胞术检测到细胞是CD38+,但是CD138-,如何判断是否是浆细胞来源呢
Eason老歌迷
可以参看这篇文献”流式细胞术检测CD38、CD138在急性白血病、浆细胞骨髓瘤表型分析中的意义”,讲的很详细。
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问
免疫荧光: 冲洗时,用PBS和PBST效果会有差别吗?用PBST背景色会明显降低?)
冷泉港蛋白
一、会有差别,PBST会好些。二、原因在哪里?1.看下PBST比PBS多T,T是一般是TWeen 20.2.结构决定功能:TWeen 20是两性表面活性剂,一头疏水,一头亲水,因此它可以洗脱掉由疏水相互作用所产生的非特异性吸附,一定程度上降低假阳性。3.常用浓度:TWeen 20通常使用的浓度是0.1%,这与它的CMC有一定关系
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问
流式细胞术检测胞内因子
Eason老歌迷
可以参考这篇文献”检测靶向治疗后急性T淋巴细胞白血病的试剂组合物及其应用的制作方法”,讲的很详细。
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问
应激颗粒免疫染色特异性低
Eason老歌迷
特异性弱,可能有几个原因。一个是标本固定、包埋不当。固定剂不佳、固定时间过长、浸蜡包埋温度过高,会导致抗原完全破坏,这些都是常见原因。由于不同的抗原对环境耐受性不同,有些标本虽然能做出一些较好的指标,但不稳定和含量低的抗原可能已消失殆尽。二是抗原修复问题。由于免疫组化技术的发展,现在能在石蜡切片中显示的指标很广。相应地,除了优质的抗体外,我们也越来越依靠各种暴露或称修复抗原的方法,包括酶消化、热修
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问
低内毒素质粒抽提如何降低RNA污染
Eason老歌迷
冬天提取质粒DNA的时候,直接把快速质粒DNA小量试剂盒放到恒温箱里温育(反正Buffer II冬天会结晶,就是需要提前温育的)到37℃后再使用。把实验室的空调开高一些,等温度升高后再做实验(记得有一年实验室一直不能重复出用户投诉的RNA污染结果,现在怀疑和空调温度打得太高了也有一定的关系)。不要急着做实验,把养好的细菌凉一凉再做(等个4~5个小时,因为细菌在不良的生长环境下会减少新陈代谢,RNA
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问
菌种保种太长回影响质粒吗?
府宅
菌体老化死亡会发生菌体自溶,1.会影响质粒产出率,2.菌体自溶后可能会有小片段的基因组DNA污染提取的质粒.
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问
做免疫荧光时没注意到加液体时吹起了气泡,做的片子也不太行,是气泡的原因吗?
Eason老歌迷
可能有气泡的原因!捞片时有气泡、切片有皱褶没展平等原因造成附贴不牢或附贴时切片下气泡过多都有可能导致结果不行。
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问
人原代Tenon's囊成纤维细胞Vimentin染色
Eason老歌迷
染的很好看,谢谢分享啊,学习到了!
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问
流式单标是否需要固定和封闭
bamboopiggy
如果染pi或膜内是需要固定的,你做膜表面不用固定,但是还是要封闭一下的。
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问
WB提蛋白浓度偏低怎么办呢?
bamboopiggy
下次裂细胞,少加点裂解液,一般wb上样20-40ug就够了。你这次的蛋白可以试试用大梳子齿的,增加上样量试试。wb,估计要看你踩到什么坑里,一步一步的解决了。各种小细节太多,包括仪器,液体,样品,膜,等等的
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问
关于CRPC中AR和细胞系选择
Eason老歌迷
22RV1是来自异种移植(在阉割引起前列腺癌衰退又在其父亲的雄性激素信赖型CWR22嫁接后复发的小鼠中连续传代)的人前列腺癌上皮细胞系;22RV1细胞系表达前列腺特异抗原。PC-3源于一位62岁白人男性IV级前列腺腺癌患者的骨转移灶;有低水平的酸性磷酸酶活性和5-α-**还原酶活性。
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问
海藻酸钠微球的用途有哪些 ?
你好几和户
海藻酸钠微球可做血管栓塞剂。通过介入栓塞靶器官血管(物理性/机械性封堵),治疗各种实体肿瘤的“KMG 及其系列载药 KMG”,涉及的临床介入治疗领域包括:中晚期肝癌、肺癌、肺结核、肺咯血、肾癌、妇产科良、恶性肿瘤、产后大出血、血管瘤、甲亢和脾亢减能、外科器官移植手术的术前栓塞等多方位多学科的临床治疗领域。
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问
免疫荧光染色准确性高吗
是个幸运的小朋友
要看选用的抗体特异性怎么样,如果特异性好,准确性就高,因此选抗体就很重要,在选抗体之前可以多看几家公司的,看看他们的说明书及模式图,有些会包含用他们公司抗体的文章,就可以去那些文章里看看这支抗体怎么样,再做决定
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问
有血清换无血清饥饿后,取0h细胞培养上清用ELISA试剂盒检测酪蛋白浓度,0h浓度应是?
Eason老歌迷
有血清换无血清饥饿后,取0h细胞培养上清用ELISA试剂盒检测酪蛋白浓度,0h浓度应是0。
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问
CAR proximal signaling CAR近端信号
Eason老歌迷
可以参看这篇文献,Title: Inefficient CAR-proximal signaling blunts antigen sensitivity是奥地利维也纳医科大学Johannes B. Huppa和德国维尔茨堡大学医院Michael Hudecek研究组合作取得最新进展。他们揭示无效的嵌合抗原受体(CAR)-近端信号减弱了抗原敏感性。该研究于2020年7月6日发表于《自然—免疫学》。
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NETs诱导
Eason老歌迷
”PMA诱导人中性粒细胞胞外诱捕网(NETS)形成的方法及其结构的研究”,你可以看看祝元峰老师的这篇文章,写的很详细。
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星形胶质细胞染色图片
bamboopiggy
你有啥问题啊?感觉染的很漂亮啊!
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问
蜡样芽孢杆菌涂板培养18个小时,有小的菌落,是否为杂菌污染?
Eason老歌迷
这个看着,我感觉并不是杂菌污染。
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问
求助,关于粪菌保存
养点鱼吃火锅
重新取吧,会冻死的,而且结果不准确没法用了。下次记得加甘油。
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