实验问答

22,053,536 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问求助 MALDI-TOF检测BSA衍生物总是测不到信号

Eason老歌迷

我做过这个反应，不同物质的化学位移不同。我的化合物中NHS中两组氢的化学位移是4.02氘代氯仿做溶剂。我做的这个反应都是搅拌过夜的，反应要求无水，我用的是重蒸试剂，你换个重蒸试剂看看，再安全点可以无水无氧。确定试剂和溶剂都没问题就没问题了。

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问rna m5c甲基化

Eason老歌迷

有。BSP是甲基化检测的金标准，这里就不细说了。主要说说MSP—甲基化特异性PCR。MSP的实验过程简单来说就是提取样本中的DNA进行亚硫酸盐转换，将转换的DNA进行定量PCR，由此来确定特异基因甲基化修饰，这样就可以实现你需要的某个特定基因甲基化检测。

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问为什么qpcr可以不测RNA浓度用水补齐

whilt-shirt

qPCR不用模板浓度一样，因为后期数据处理时有内参作为对照

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问浙江中医药大学学报审稿周期?

你好几和户

由于期刊是医学核心刊物，审稿周期至少需要3个月的时间，也是说，投稿后一般3个月之内会给予回复，期间作者可随时查询稿件信息。

3 回答286 围观

问请问科研小白是不是不适合做混合型研究？

麻黄连翘赤小豆

如果有钱又有时间又有大佬帮助，可以做，自己一个人单干会很累，还做不出成果，建议再多考虑考虑

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问怎么查询目的蛋白是不是磷酸化的呢？

冷泉港蛋白

UniProt上翻译后修饰可以看到是否磷酸化

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问肿瘤无病生存率和无复发生存率

你好几和户

无病生存期（Disease-free survival,DFS）的定义是指从随机化开始至疾病复发或由于疾病进展导致患者死亡的时间。该指标也常作为抗肿瘤药物III期临床试验的主要终点。某些情况下，DFS与OS相比，作为终点比较难以记录，因为它要求认真随访，及时发现疾病复发，而且肿瘤患者的死亡原因也很难确定（16）。肿瘤患者常有合并症（如，心血管病），这些合并症可能会干扰对DFS的判断。并且，肿瘤患者

3 回答1111 围观

问【求助】Transwell共培养

balalaLy

这种做法理论上讲是可以的，但实际操作起来可能受影响因素比较多

3 回答613 围观

问求助：NFkB这个通路

balalaLy

检测IKK/ikba/P65的磷酸化,ikba的降解情况

4 回答1255 围观

问发夹DNA片段制好后存放到4℃还是-20℃，能存放多久，会影响发夹结构不呢

你好几和户

-20放上个半年一年的也是没有问题。4度的话放个一两个星期也是可以的。

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问CCK8.实验OD值的范围必须在1附近吗？

balalaLy

OD值跟细胞数和孵育时间有关系，孵育时间太久、细胞太满检测结果不是很准的，跟在不在1附近没什么影响。当然，如果孵育时间1-2小时，OD在1以内是比较理想的，说明细胞数比较合适。

3 回答11391 围观

问感受态细胞里面发生重组反应

申东熙老伯

可能是培养细菌的时间过久，一般培养12-16小时就很够了。

3 回答431 围观

问新手小白WB条带分析不懂，求大佬指点

求求不要翻车啦

第二张图有小黑点，问题出现在奶粉没溶好。条带不清晰，或没有，跑电泳，染胶，如果条带清晰，说明是转膜的问题，蛋白都没转过去，可能是你夹三明治的问题。如果条带不清晰，说明你的样品有问题。

5 回答556 围观

问小鼠气道给药

whilt-shirt

有可能是气道分泌物，应该对实验结果影响不大

4 回答557 围观

问小鼠脑组织切片

丁香一方

固定，取材当天即把所需包埋的组织取出后放入4%的多聚甲醛中（12h);冲水,12小时（注意水流不需要太大，不可将水流直接冲击组织)脱水，60%酒精 4h（或者 60%酒精 4℃12h）→70%酒精 4h→80%酒精 4h→90%酒精 4h→95%酒精4℃12小时→100%酒精Ⅰ2h→100%酒精Ⅱ 2h→100%酒精III 2h透明，二甲苯Ⅰ5+3 min→二甲苯Ⅱ5+3 min→二甲苯Ⅲ5+3

3 回答3510 围观

问25个炎症因子的检测

balalaLy

可以做RNA测序，价格也不是很贵，省时省力

3 回答732 围观

问求助求助

精准检验每一天

可以构建有无转座子的实验来进行验证，然后加以 WB实验加以证明！

1 回答504 围观

问裸鼠种瘤后一月，开始大量死亡，解剖后发现肝部有大量白点，求大神指教这是什么原因。

dxy_5voi17jq

感染了MHV（鼠肝炎病毒），及时淘汰，动物房和所有物品消毒/灭菌，重新购买动物，隔离观察，最好做一下ELISA，同时，肿瘤株也做一下，尤其是鼠源性细胞

4 回答1497 围观

问核酸阳性质控VIC通道基因不起，内参和FAM通道基因表达的原因

哈哈好久

最好重新做一次，找能确定起的阳性再来一次，不然光一次无法确定是你操作还是什么原因

3 回答1014 围观

问时间分辨荧光层析试纸CV值如何控制

精准检验每一天

可以从两方面解决问题，一是微球构建是否均匀，二是微球所处的环境是不是稳定。这两个解决了就应该没有问题了！

1 回答703 围观

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