无蛋白质的区域具有高背景

如果是所有的条带都这样，就是封闭的不好，如果是有的没有，就是抗体的饿特异性不好。

如果是所有的条带都这样，就是封闭的不好，如果是有的条带有这样子，有的没有的话，就是抗体的饿特异性不好。

背景太高可能是，由于封闭时间过短或封闭缓冲液使用不当。你的一抗或二抗的浓度过高所致：适当降低抗体浓度。洗涤不够充分：可以增加洗涤的次数。孵育抗体的温度过高：一抗的孵育温度以4°C左右为宜。转印膜干燥了。

封膜的时间延长一点应该就可以了

有可能是封闭不完全或者膜没洗干净导致的

封闭得不好，或者洗膜洗得不够，延长一下洗膜时间