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问
请问下这种细胞污染是黑胶虫污染吗?
Eason老歌迷
你可以拿显微镜观察一下,在400X倒置显微镜下,黑胶虫有典型的布朗运动,就是不规则的原地小距离抖动,像黑色的小虫游来游去。可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去。
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问
血清离心需要4度吗?转速时间是多少呢
Eason老歌迷
血清离心不需要4℃,转速3000-3500,三分钟即可。
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问
蛋白纯化问题,换了不同载体,不同感受态,都表达不出目的蛋白
Eason老歌迷
感觉还是你的质粒没有构建好,你可以查查文献,看大家表达这个目的蛋白都用什么载体。
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问
请教下,我的rt-lamp 实验的荧光图为什么是这样,用等温扩增仪做的,第一张是荧光图,第二张是熔解曲线图,有什么办法可以解决啊
Eason老歌迷
你看看是不是溶液浓度太浓了,感觉有点像自蚀。
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问
免疫组化,阳性和阴性有严格的界限吗?
dxy_gwrp7ndq
抗原表达必须在特定部位,有些免疫组化的定位在细胞膜,有些在细胞质,有些在细胞核,所以在特定部位阳性表明是真正阳性;如果在非特定部位阳性,或者整个切片阴性,都会判定免疫组化是阴性,或者是假阳性;
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问
免疫组化,什么时候需要进行抗原修复,怎么辨别?
dxy_gwrp7ndq
阳性物反应不强,时隐时现,表达不均匀,有时可出现假阴性,这时就要抗原修复
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问
求助WB内参不齐,如何解决?
Eason老歌迷
如果内参没有选择错误,而只是内参不齐的话,那说明你的蛋白定量有问题,只需要根据内参的IOD做一下上样量的调整就可以了。
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问
一抗用鼠抗还是兔抗?
Eason老歌迷
一般我们都不裁膜了,可以按照你的这样做法来做,我觉得可行。
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问
第一张WB条带为什么会这样子?有没有大佬解决一下
Eason老歌迷
下面图的条带还行了。上面图这个看着像是上样量太大了,或者是你选的抗体特异性不高。
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问
wb电泳问题!求助
Eason老歌迷
有几个原因,一个是你的电泳液使用了几次更换。一个是你配胶混匀了吗?一个是你的电泳条件是不是设置的正确。一个是你的buffer换了吗?
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问
求助大佬
Eason老歌迷
把细胞放入0.2%的PFA中,4°过夜,然后换成30%的蔗糖过夜(组织沉入瓶底即可)。放入OCT中包埋(需准备液氮瓶和包埋的小塑料盒)。切冰冻切片,-80°保存。取出切片,在室温中静置10min左右。切片放入0.2%的PFA中,冰上10min。用PBS+2mMMgCI2清洗,冰上10minX2次(500mlPBS+1ml 1M MgCl2)c将切片放入detergentrinse中,冰上10min
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问
感受态-80保存后,断电了1天,还能用吗?
Eason老歌迷
你当时拿出来的时候,冰箱是多少温度,如果温度保持很低,是可以用的。
3 回答
499 围观
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问
利用TRV沉默植物内源基因
Eason老歌迷
是不是注射的浓度太大,对植物造成了伤害。
1 回答
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问
qpcr测蛋白Tm值
Eason老歌迷
测蛋白Tm值?学习了。加样有没问题,程序因该和普通qpcr一样是相对固定的吧,另外这个机器需要用ROX矫正么,应该一一排除。
4 回答
1293 围观
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问
求助,荧光酶标仪检测ROS活性氧,空白对照的OD值反而更高是什么原因
Eason老歌迷
是不是酶标仪没有调好?你的目测结果与酶标仪读值是否对的上,也可能使酶标仪设定参数不合适。
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问
不同状态下,细胞的代谢表型一样吗
dxy_gwrp7ndq
细胞在不同状态下,代谢表型是会发生改变的
3 回答
1163 围观
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问
免疫组化-研究生科研问题
whilt-shirt
一般来说至少重复3次,每次每组至少3个样本
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1876 围观
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问
免疫荧光用的玻璃片怎么灭菌啊?酒精可以吗?
dongshenmedonga
我们一般用酒精擦拭,晾干即可使用了。也有无菌包装的
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问
做免疫荧光实验,用组织切片和培养细胞的样本,这两者对结果有什么影响
飘雨4666
对结果影响不大,二者染色方法一样,只是固定方法不同而已,细胞固定用甲醇,切片固定用多聚甲醛
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问
细胞给药
dongshenmedonga
建议再筛一次浓度,确定有效作用区间。
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