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实验问答

28,086,076 科研人在看

问小白:把基因分为高低表达组，可以依据原始的counts数据分组吗？比较不同组别的基因表达情况，可以直接比较原始的count数据吗

huarenqiang5

可以依据原始的counts数据分组。

4 回答1399 围观

问每次做wb都是黑乎乎一片

loveliufudan

WB中出现黑色的背景可能是由多种因素导致的。下面是一些可能的原因：1.过量的抗体：使用过量的抗体可能会导致非特异性结合，从而导致高背景值。2.不当的洗膜条件：使用过于粗糙或过于缓慢的洗膜步骤可能会导致高背景值。3.抗体过时或受损：过时或受损的抗体可能会导致高背景值。4.蛋白质降解：样品中蛋白质降解可能会导致高背景值。5.膜过于湿润：膜过于湿润可能会导致高背景值6.检测抗体非特异性结合: 分子量1

3 回答29430 围观

问干预研究，自身前后对照，结局为连续变量，如何计算样本量

loveliufudan

如果没有找到类似文献获取总体样本的均值和标准差，那么可以考虑进行预实验来估计这些参数。预实验的样本量取决于研究的类型和目的，通常可以使用10-20个样本进行预实验。另外，还有其他计算方法可以考虑，如：1.Wilcoxon符号秩和检验：非参数性的统计检验，用于检验两个样本的中位数是否相等。2.Mann-Whitney U检验：非参数性的统计检验，用于检验两个样本中值是否相等。3.Kruskal-Wa

1 回答3775 围观

问生存分析。求救！

loveliufudan

倾向匹配 (propensity score matching) 是一种统计学方法，用于在对照组和实验组之间建立相似的个体特征，从而减少因为纵向关系而导致的偏差。在倾向匹配之后，两组手术例数不一定相等，但是两组之间的基本特征应该是相似的。在单因素分析中，手术方式可能是一个重要的因素，因为不同的手术方式可能会对病人的预后产生影响。然而，在倾向匹配后，两组之间的基本特征应该是相似的，所以进行单因素分析

2 回答607 围观

问山东医药投稿

蓝莓小布丁

不是退稿，初审复审均已通过，接下来等待编辑部的处理结果即可

2 回答3035 围观

问中国中医基础医学杂志投稿

蓝莓小布丁

系统无法登录可能是系统维护等技术性问题，可以发邮件或电话咨询一下杂志社。

2 回答553 围观

问钙转为什么转染不同的质粒，转染质粒的量是相同的，最后wb跑出来表达量不同

loveliufudan

可能是因为质粒的质量不同导致的。质粒质量不同会影响质粒在转染过程中的效率，从而导致最后转染后表达量的差异。为了保证最后各质粒转染后表达量差不多，可以采用以下措施：1.使用相同的质粒质量，并在转染前进行纯化。2.使用相同的质粒转染量。3.在转染过程中保持温度、时间等操作条件的稳定性。4.检测每个质粒的转染效率，并根据效率调整转染量。5.在收细胞时间上统一。6.对每个质粒进行正确的控制质粒。

2 回答566 围观

问基因突变

loveliufudan

设计overlap PCR插入碱基的引物时，应该考虑以下几点:1.选择目标序列和插入碱基的序列的区域。在设计引物时应确定插入点的位置，并确保引物与目标序列和插入碱基序列的重合部分足够长。2.设计一对重合序列长度较长的引物，使得一个引物与目标序列的5'端重合，另一个引物与插入碱基的序列的3'端重合。这对引物将在目标序列的5'端和插入碱基的序列的3'端处生成新的片段。3.设计另一对引物，其中一个引物与

1 回答606 围观

问求内皮tip cell诱导分化方案

loveliufudan

人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 诱导分化为 tip cell 一直未获成功可能是由于多种因素导致的。下面是一些可能的原因：1.培养条件不当：tip cell 的分化需要较低氧气水平和较高细胞密度。2.培养基成分不当：tip cell 的分化需要特定的成分如血管内皮生长因子 (VEGF) 。3.细胞源问题：不同的细胞源可能会对分化结果产生影响。4.分化方法问题：tip cell 的分化需要特定的分

2 回答548 围观

问RAW264.7细胞造炎症模型

loveliufudan

根据你提供的信息，你已经尝试了三次造成炎症模型，但都没有成功。这可能是由于多种原因。1.LPS浓度过低：在你的实验中，你使用的最大LPS浓度为2.5ug/ml，8ug/ml，64ug/ml，这可能不足以诱导细胞产生炎症反应。建议尝试使用更高的浓度，或者使用其他诱导因子。2.作用时间过短：你在实验中使用的作用时间是12h，18h，24h，4h，这可能不足以诱导细胞产生炎症反应。建议延长作用时间。3.

1 回答8077 围观

问求助！！

loveliufudan

出现细胞发酵罐上面的气泡和乙醇黄色化可能是由于菌落过多导致的氧化过程，也可能是污染。如果是因为菌落过多导致的氧化过程，可以尝试调整细胞密度，减少细胞数量来降低氧化反应，同时增加空气更换率。如果是污染造成的，可以采用严格的消毒措施，如使用70%酒精进行消毒，保证培养环境的干净，注意观察细胞培养状态，及时处理异常现象。

1 回答614 围观

问大鼠胼胝体取材

loveliufudan

分离大鼠脑胼胝体的方法通常包括使用微剖技术。微剖技术包括使用高倍镜和精细的手工技巧来切开大脑组织，以便找到并分离出胼胝体。确定胼胝体位置的方法包括使用脑图谱和免疫组化。脑图谱是一种解剖学工具，可以帮助确定大脑中不同部位的位置。免疫组化是一种生物学技术，可以使用特殊的抗体来确定大脑中特定细胞类型的位置。在实验中，需要找到大鼠脑的位置并确定前额叶和顶叶区域，然后进行微剖，找到胼胝体。另外，在分离胼胝体

2 回答2109 围观

问不同种属来源小鼠BMDC能否识别肿瘤OVA

loveliufudan

如果用 BALB/c 来源的肿瘤细胞系构建的带 OVA 的细胞株与 C57 来源的 BMDC 共培养，可能会检测到 BMDC 摄取并在膜上呈递 OVA-MHC1。BMDC 是一种具有免疫活性的细胞，它们可以通过摄取外来抗原来诱导免疫反应。在共培养的过程中，BMDC 可能会摄取带 OVA 的肿瘤细胞，并在其膜上呈递 OVA-MHC1。然而，这种情况的可能性并不是100%，还需要进一步的实验证明。需要

1 回答793 围观

问RAW巨噬细胞极化求助

loveliufudan

这种情况可能是由于细胞在当前状态下对LPS刺激的反应较少。可以考虑以下几种方法来改变细胞的反应性:1.选择不同类型的刺激物，例如IFN-γ或TNF-α等。2.尝试使用不同浓度的LPS刺激细胞，试验不同时间长度。3.尝试使用其他细胞激活剂，例如PMA或ionomycin等。4.尝试使用其他细胞系或细胞来源。5.检查培养条件，确保细胞在适当的温度和湿度条件下培养。6.选择培养细胞时机，确保细胞处于适当

1 回答3525 围观

问自噬抑制剂CQ和3A如何选择？

loveliufudan

选择哪种抑制剂，取决于研究目的和细胞类型。如果研究目的是抑制细胞内酸性环境下的自噬，那么选用CQ。如果研究目的是抑制类似于胞质自噬的途径，那么选用3-MA。或者研究目的是研究自噬在细胞内的不同途径，那么两种抑制剂都需要使用。需要注意的是，在使用自噬抑制剂时，需要根据实验需要，选择合适的剂量和时间。需要在使用之前对细胞的敏感性进行验证。

2 回答3412 围观

问请问，snu449细胞容易成瘤？

huarenqiang5

比较容易成瘤，细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。传代比例初次传代建议1：2传代（1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿）。一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶。

2 回答874 围观

问已经确定诱导纯化出来的菌，隔段时间去纯化，洗脱后液体浓度降低，求大佬指导

loveliufudan

一.可能是由于以下几种原因：1.细菌繁殖过程中可能有细菌死亡或活性下降，导致细菌数量减少。2.细菌在培养过程中可能发生了某种程度的滴落，导致细菌数量减少。3.也可能是细菌在洗脱过程中被洗脱液吸收或洗脱不彻底导致。二.1.使用过的 GST 柱子可能会对其他蛋白的纯化产生影响。这个柱子以前没有纯出来东西的原因可能是因为没有选择合适的蛋白进行纯化，或者没有调整适当的条件（例如浓度，pH值）。2.使用过的

2 回答465 围观

问星形胶质细胞功能验证可以用谷氨酰胺含量检测么

飞跃迷雾1

星形胶质细胞是谷氨酸（Glu）和γ-氨基丁酸（GABA）代谢的场所，谷氨酸和GABA被神经元释放后都可以被星形胶质细胞所摄取，经酶催化后可转变为谷氨酰胺（Gln），Gln是可以分别被谷氨酸能和GABA能神经元利用的前体，分别可以被转变为谷氨酸和GABA。

3 回答561 围观

问请问pcR大神核酸CT值

勇往无前G66G

有影响，取样要尽量完美操作，提高纯度。

5 回答702 围观

问coip实验结果coip组两条带原因？

loveliufudan

可能是由于以下几种原因：1.A 蛋白和 B 蛋白之间存在多种相互作用方式，如直接相互作用、间接相互作用或通过第三方蛋白质进行相互作用。2.A 蛋白和 B 蛋白之间存在非特异性相互作用。3.在 A 蛋白和 B 蛋白之间存在负调控关系。4.A蛋白自身有多余的结合位点，导致自结合的情况5.在实验中，Co-IP的抗体杂质或者不纯的可能导致结果不准确。6.实验流程中可能有误差，如抗体结合不足，结合过多等。这

2 回答2005 围观

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