已经确定诱导纯化出来的菌，隔段时间去纯化，洗脱后液体浓度降低，求大佬指导

一.可能是由于以下几种原因：

1.细菌繁殖过程中可能有细菌死亡或活性下降，导致细菌数量减少。

2.细菌在培养过程中可能发生了某种程度的滴落，导致细菌数量减少。

3.也可能是细菌在洗脱过程中被洗脱液吸收或洗脱不彻底导致。

二.

1.使用过的 GST 柱子可能会对其他蛋白的纯化产生影响。这个柱子以前没有纯出来东西的原因可能是因为没有选择合适的蛋白进行纯化，或者没有调整适当的条件（例如浓度，pH值）。

2.使用过的 GST 柱子可能会导致蛋白结合活性降低，因此在纯化其他蛋白之前需要重新配制和验证柱子的结合效率。另外，在使用过的 GST 柱子纯化其他蛋白之前需要对柱子进行清洗和消毒以降低杂质的干扰。

洗脱后液体浓度降低主要考虑下面几点：

（1）洗脱缓冲液的体积太少，增加洗脱缓冲液的体积。

（2）洗脱的时间不够，增加洗脱缓冲液与磁珠反应的时间。

（3）洗脱缓冲液中谷胱甘肽浓度太低，增加洗脱缓冲液中谷胱甘肽的浓度。

（4）洗脱缓冲液的pH过低，增加洗脱缓冲液的pH值。将 pH 增加到 8-9，会增强洗脱而不用提高洗脱所用 GSH 的浓度。

（5）洗脱缓冲液的离子强度过低，增加洗脱缓冲液中的离子强度，在洗脱缓冲液中加入0.1~0.2M的氯化钠。

（6）洗脱缓冲液中的谷胱甘肽被氧化，使用新鲜配制的洗脱缓冲液。