一定准时毕业
细胞目前状态较少分化,但是LPS浓度(0.1/1ug/ml)刺激24-48小时均没有变化,细胞形态无变化,PCR跑极化的标志物iNOs,Arg1,ym1,TNF-a均与正常组类似。
目前的操作是
六孔板铺板,10%血清培养基养过夜贴壁,然后用10%的培养基配药,再养24~48小时。
也试过细胞贴壁之后换成无血清培养基。使细胞同步化,后续无血清培养基稀释药物,细胞状态均无改变。无血清培养基的细胞有点飘,但是并没有细胞形态上的变化。
请问大家这该怎么办呢?
loveliufudan
这种情况可能是由于细胞在当前状态下对LPS刺激的反应较少。可以考虑以下几种方法来改变细胞的反应性:
1.选择不同类型的刺激物,例如IFN-γ或TNF-α等。
2.尝试使用不同浓度的LPS刺激细胞,试验不同时间长度。
3.尝试使用其他细胞激活剂,例如PMA或ionomycin等。
4.尝试使用其他细胞系或细胞来源。
5.检查培养条件,确保细胞在适当的温度和湿度条件下培养。
6.选择培养细胞时机,确保细胞处于适当的周期。
7.尝试不同的培养基,比如含血清或不含血清的培养基等。
8.检查细胞培养过程中是否有污染,如果有污染,需要进行细胞清洗。
9.可以考虑给细胞加入其他诱导因子,比如EGF或FGF等。
10.可以考虑细胞的分化或者诱导分化,来改变细胞的反应性。
这些方法可以帮助你找到最佳的细胞反应性,但是需要许多尝试与验证。
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