实验问答

22,010,018 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问昨天新倒的平板，没有用，密封放四度了，今天长出了雪花状的东东，这是个什么情况，有大佬知道吗？

凌晨三点Dxy

污染的原因有很多，是所有平板都这样，还是就一个？

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问水和土壤中有机磷农药残留量测定？

凌晨三点Dxy

问题写得详细点吧，就这样是想问什么问题呢？

1 回答294 围观

问各位大佬！如何保证细胞

dxy_cqntutw4

可能不太一样，因为细胞传代后代次升高；

1 回答299 围观

问4915bp片段与pcDNA3.1载体一直连接不成功

丰丰2018

这个片段属于长片段，用酶切连接的话，效果一般，可以考虑用同源重组的方式。有联系方式吗

1 回答448 围观

问在实验中，最多可以同时检测几种不同蛋白在细胞内的成像？分别选择哪几种荧光蛋白作为报告蛋白可以实现？说明理由。

migger

只要蛋白荧光在荧光发射图谱上的峰不重叠，颜色也不同就可以。跟显微镜没多大关系，主要是蛋白。

1 回答447 围观

问Wb小白求助各位大佬肠occludin

dxy_18063lu9

请问你跑出来了吗？？用什么参数？条带怎么样？

1 回答612 围观

问PMG36e质粒使用方法有吗，包括转化与链接别的片段。实验总是出错。转化细菌生长慢，链接感觉连不上。

吱吱吱1231abc

你好请问你找到原因了吗我的也是一直连不上求指教

4 回答1050 围观

问原代乳鼠心肌成纤维细胞培养

loveliufudan

以下是一些建议： 1. 血清浓度：血清在细胞培养中提供营养物质和生长因子，但其中的成分可能会对细胞活化和纤维化产生影响。一般来说，对于心肌成纤维细胞的培养，常用的血清浓度为10-15%。然而，较高的血清浓度可能会增加细胞活化的风险。您可以尝试降低血清浓度，如5%或更低，以减少细胞的非特异性激活。 2. 血清来源：不同批次的血清可能存在差异，可能会对细胞活化产生影响。建议使用相同来源和批次的血清来提

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问THP-1细胞经过PMA诱导成M0后IL-1b分泌量很高

loveliufudan

对于你所观察到的IL-1β高表达的情况，有几个可能的解释： 1. PMA诱导的剂量或时间可能较高或较长，过度刺激了THP-1细胞，导致它们产生炎症反应。你可以尝试减少PMA的浓度或缩短处理时间，看是否能降低IL-1β的水平。 2. PMA自身具有刺激活性，可能会诱导细胞产生炎症反应。一些研究已经显示，PMA可以刺激细胞产生炎症细胞因子。 3. 如果你使用的是酶联免疫吸附试验（ELISA）或者其他类

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问PCR，U6做内参

sswei

只要是样本质量合格，U6做内参的CT值在10-20之间都可。

4 回答1960 围观

问Caco2细胞单层膜

dxy_p7vh6ol3

你用的荧光素钠浓度是多少，我用400ug/ml细胞飘了

3 回答851 围观

问小鼠MCAO造模求助

油腻鸭呀

这是瑞沃德线栓的问题，我认为是他家品控问题，它家线栓的线栓头没堵住，而且他家线栓很有意思，试用装效果最好，买的时候看看有没有质检员检验。

3 回答1631 围观

问TNF和IFN诱导特应性皮炎的细胞炎症模型

golden_kqh3

你去搜桧木醇对特应性皮炎文献。今天有一篇这个的5分左右的文章里面研究了改善hacat细胞的凋亡机制。用的20ng/ml。不过文章里面主要是用电镜观察凋亡的

4 回答1706 围观

问微量棋盘稀释法联合药敏试验结果判读

loveliufudan

在你的试验中，A药和B药的浓度梯度分别为64、32、16、8、4、2、1、 0.5和1024、512、256、128、64、32。如果你在每个孔中都观察到细菌生长，那么说明细菌对两种药物都耐药，FIC无法计算。如果你在某些孔中没有观察到细菌生长，那么你需要找到最低的A药和B药的浓度组合，使得细菌无法生长，这就是MIC。然后用公式计算FIC，并根据上述标准判断相互作用。例如，如果你发现在A药浓度为8

2 回答7045 围观

问人肺泡巨噬细胞提取与培养

__miraitowa__

求分享从肺泡灌洗液中提取巨噬细胞的经验

4 回答929 围观

问有关Sytox Green

小铁匠的米兰

请问兄弟买的是哪家的？货号能不能分享一下

4 回答537 围观

问pubmed send to没有file选项

土井挞克树

右边可以导出，使用文献导出软件。

3 回答781 围观

问求助!免疫荧光

实验小宁

我的冰冻切片脱片率高达50%以上，这是啥原因有没有解决办法，延长复温时间？20u的全脱了

3 回答706 围观

问人外周血流式，结果treg的细胞内foxp3上机测不出来，是哪里出了问题?

Eason老歌迷

破核的时间我觉得是最重要的原因，破核时间不充分会造成后续步骤都染不上。其次是Foxp3染色的浓度与染色时间。

2 回答529 围观

问pcr时模版DNA浓度一般是多少最合适呢？

Tl32

pcr技术原理上面说过，30到100ng都行

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