有没有大佬知道WB出现这种过曝光的条带是为什么啊？有什么解决办法吗？

Western blot出现过曝光的条带通常是由于曝光时间过长或者抗体浓度太高所导致。解决这个问题的办法包括：

1.调整曝光时间：

减少曝光时间，尤其是在使用化学发光检测系统时。

2.优化抗体浓度：

降低一抗或二抗的浓度。

3.洗涤步骤：

增加膜的洗涤次数或时间，以减少非特异性结合。

4.阻断：

确保使用足够的阻断剂以减少背景。

5.样品量：

如果可能，减少加载的蛋白样品量。

这些调整有助于减少过曝光并获得更清晰、更具特异性的条带。

原因：中心部位高浓度HRP把底物消耗过快，中间部位底物消耗结束之后就不发光了

解决办法：降低蛋白量，降低一抗和二抗的浓度。

补救措施：可以调整一下曝光时间，在底物消耗完之前完成显影。最好还是从降低蛋白量，降低一抗二抗浓度入手。

降低一抗、二抗浓度,蛋白上样量也可以降低。

条带很浓，可能是因为蛋白上样太多了

因为蛋白上样太多了，导致条带很浓，底物消耗光了，所以条带出现反白