百泰派克-李工
在转膜过程中使用转膜缓冲液浸泡膜是出于几个关键原因:
1.膜的活化:
某些膜材料,如硝酸纤维素或聚偏氟乙烯(PVDF),需要通过缓冲液活化以提高其亲和力,确保蛋白质有效地从凝胶转移到膜上。
2.防止干燥:
保持膜的湿润状态防止在转膜过程中干燥,干燥的膜可能导致蛋白质转移不均匀或效率降低。
3.维持pH和离子强度:
缓冲液有助于维持适宜的pH和离子强度,这对于蛋白质的稳定性和转移效率非常重要。
4.减少背景噪音:
适当的缓冲液还可以帮助减少背景噪音,提高后续检测(如Western Blot)的信号对比度。
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目的是为了平衡膜上的电荷,提高吸附性。
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需要浸湿,保证后续转膜的各点速度一致
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便于在转膜过程中保持膜的湿润状态。
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首先用甲醇浸泡PVDF膜进行活化,其次要浸泡在Western转膜液中,是为了平衡表面离子和电荷等因素
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