兔多抗用溴化氢琼脂糖凝胶纯化没有成功是什么原因？一般怎么验证抗原偶联上了？

使用溴化氢琼脂糖凝胶纯化兔多抗失败可能有多方面的原因，比如：

1.凝胶本身的问题：

凝胶的特性可能不适合所用的抗原或抗体，不同的凝胶有不同的孔隙大小和亲和力特性，确保使用的琼脂糖凝胶适合于你的实验。

2.偶联效率低合：

如果抗原和载体（如琼脂糖珠）的偶联效率不高，可能导致目标抗体的亲和力不足。

3.洗脱条件：

洗脱条件（如pH、盐浓度）可能不适宜，导致抗体不能有效从凝胶中洗脱出来。调整洗脱液的pH值或盐浓度可能有所帮助。

为了验证抗原是否成功偶联到了抗体，可以采取以下方法：

1.免疫印迹（Western Blot）：

使用已知的特异性抗体对偶联产物进行Western Blot，观察是否有特异性带出现。

2.ELISA（酶联免疫吸附测定）：

用你的抗体包被微孔板，然后加入已知的抗原，检测抗体是否能够捕获抗原。

3.免疫荧光或免疫组化：

如果可能，使用免疫荧光或免疫组化检查抗体是否能够特异性结合到细胞或组织中的目标抗原。

每种方法都有其优缺点，选择哪种取决于你的具体需求和实验条件。