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实验问答

31,782,748 科研人在看

问培养增多人的软骨细胞具体操作方法及步骤

loveliufudan

当涉及到软骨细胞的具体培养方法时，以下是详细的步骤和操作：1. 细胞准备： - 从合适的来源（如人体骨骼或软骨组织）获得样本，通常需要手术或解剖获取。 - 将组织样本转移到含有生理盐水（PBS）的培养皿中，以保持组织的湿润。2. 细胞分离： - 用刀片或剪刀小心地将组织切割成小块，以增加细胞表面积。 - 将组织块置于含有消化酶（如胶原酶、DNA酶）的消化液中，通常在37摄氏度下进行

3 回答1074 围观

问腐败梭菌的培养方式是什么

loveliufudan

以下是一般腐败梭菌的培养方法： 1. 培养基选择：腐败梭菌可以在一般的富含营养的培养基上生长，例如肉汤、营养琼脂（如Tryptic Soy Agar，TSA）等。此外，也可以使用选择性培养基，如柠檬酸苏氨酸蛋白胨琼脂（CCA）等，以抑制其他细菌的生长。 2. 厌氧条件：腐败梭菌是厌氧菌，因此在培养时需要提供无氧或低氧条件。常见的方法是使用厌氧罐或厌氧箱，并在培养容器中添加适当的还原剂，如半乳糖酸或

3 回答1206 围观

问荧光定量检测CRP试纸，HOOK效应一般出现在什么浓度比较好？

sswei

当抗原抗体出现HOOK时经常会超出检测限而不能准确定量的检测出相关的数值，只有抗原抗体比例合适时才出现最强的反应，在检测限内检测出准确的数值。

3 回答1091 围观

问edu染色488和33342为什么会这样啊

loveliufudan

可能是由于几个因素引起的： 1. 荧光染料渗透：有可能你的HOECHST 33342不仅染色了细胞核，也染色了细胞质。这可能是由于渗透作用，尤其是在高浓度或长时间孵育的情况下。 2. 细胞固定和渗透步骤：固定和渗透步骤对荧光染料的进入细胞内部起关键作用。如果使用的固定剂或渗透剂不恰当，可能会影响荧光染料的分布。 3. 具体的抗体或标记物：对于你的488染料，可能你的目标抗原主要位于细胞膜，而不是细

3 回答1450 围观

问超声破碎的基因组dna怎么连接到我的质粒载体上，听说要修复加接头，怎么修复，接头是自己合成还是有专门试剂盒

huarenqiang5

接头建议使用专用试剂盒进行比较好。

3 回答750 围观

问氮蓝四唑法测定SOD活性时，反应液和酶液进行光照反应后，反应液出现混浊，暗中静止10分钟还是程混浊状态是什么原因？

loveliufudan

可能有以下几种原因： 1. 沉淀形成：在氮蓝四唑法中，光照反应会产生氮蓝四唑还原产物，有时会形成沉淀，导致反应液的混浊。这种沉淀可能是反应产物的沉淀或其他反应副产物的沉淀。 2. 蛋白质凝聚：反应过程中，可能发生蛋白质的凝聚现象，导致反应液的混浊。这可能是由于特定条件下蛋白质的聚集作用，例如过高的温度、pH变化或其他离子条件。 3. 反应失效或其他问题：在进行实验时，如果反应液中的某个组分出现问题

2 回答1848 围观

问如何筛出高产蛋白酶的乳酸菌

loveliufudan

要筛选高产蛋白酶的乳酸菌，可以按照以下步骤进行： 1. 菌种收集：收集不同的乳酸菌菌株，可以从实验室库存中选择或从自然环境中分离得到。 2. 制备培养基：制备含有适当碳源和氮源的培养基，以满足乳酸菌的营养需求。添加一些可能诱导蛋白酶产生的物质，如蛋白质基质。 3. 筛选方法1：表型筛选。将菌株分别接种到含有蛋白质基质的琼脂板或液体培养基中，培养一段时间。然后，使用蛋白酶检测方法（如凝胶酶活性测定、

3 回答1059 围观

问c57BL/6J小鼠HFD联合多次小剂量stz造模二型糖尿病注意事项？

loveliufudan

有一些注意事项需要考虑： 1. 高脂饮食：确保小鼠按照计划接受高脂饮食，六周的饲养期对于诱导肥胖和胰岛素抵抗具有充分的时间。 2. STZ注射：使用30mg/kg剂量的STZ，每天连续腹腔注射5天。在每次注射前禁食小鼠12小时以上，以确保STZ能够充分进入体内。 3. 血糖监测：在STZ注射后的适当时间点测量小鼠的血糖水平。通常，建议从STZ注射后的第3天开始测量血糖，每隔几天进行一次测量，直到血

3 回答2797 围观

问关于危险因素的meta分析

loveliufudan

您对Meta分析的理解基本上是正确的。Meta分析是一种综合性的研究方法，通过汇总和分析多个独立研究的结果来评估特定研究问题的整体效应。在危险因素的Meta分析中，研究者通过检索和纳入多个研究，从而扩大样本量，以便更准确地评估危险因素与特定疾病之间的关系。在Meta分析中，一般会进行单因素分析来确定每个危险因素与疾病之间的关联程度。通过整合多个独立研究的数据，可以得到更具统计学意义的效应估计值和置

3 回答2641 围观

问求助CC A分析用 R语言做了CCA分析，结果下表，Pr (>r)是啥意思，P值吗

loveliufudan

在CCA（Canonical Correspondence Analysis）分析中，“Pr(>r)“是相关系数检验的p值，用于评估特征和环境因子之间的相关性。在R语言中，进行CCA分析的函数是cca()，通常会输出一个结果对象，其中包含各种统计信息和检验结果。下表中的”Pr(>r)“列显示了每个特征与环境因子之间的相关系数检验的p值。p值是用于评估统计检验的结果的指标，它表示在零假设

3 回答1201 围观

问1次自变量和3次因变量如何分析？

loveliufudan

在您所描述的情况下，如果自变量只有基线数据，而因变量有三次重复测量数据（纵向数据），您可以考虑使用GEE进行分析，该方法适用于分析纵向数据和考虑相关性的情况。GEE是一种广义估计方程方法，用于处理相关数据和重复测量数据。它可以用于探索自变量和因变量之间的关系，并考虑到测量之间的相关性。通过GEE，可以估计自变量对因变量的整体影响，并通过对不同时间点的测量数据进行建模，捕捉到时间的效应。关于缺失值处

2 回答932 围观

问meta小白提问//药物对比生存率分析

huarenqiang5

不需要踢出，你可以直接在对照组数据录入0即可。

3 回答1012 围观

问有谁投过Annals of Noninvasive Electrocardiology

loveliufudan

一般来说，两个月的等待时间在许多学术期刊中都是正常的。这并不意味着你的论文会被拒绝或者出现其他问题。

3 回答342 围观

问Meta分析

loveliufudan

下结论时应该综合考虑多个因素： 1. 结果稳健性：如果逐一剔除法得到的结果在多次实验中保持一致，而剪补法的结果变化较大，那么可以认为逐一剔除法的结果更稳健。 2. 样本大小：考虑样本的数量和特征。如果样本较小，剪补法可能更容易受到极端值的影响，导致结果不稳定。而逐一剔除法通过多次计算，可以提供对不同样本子集的平均结果，有助于降低随机性的影响。 3. 数据分布：考虑数据的分布特征和假设的合理性。剪补

2 回答1037 围观

问关于JAMA network open注册的问题

loveliufudan

以下是几个可能的解决方案： 1. 确认密码要求：再次检查密码要求，确保密码满足所有要求，包括长度要求、大写字母、小写字母和特殊字符的要求。可能有其他特殊要求，例如不能包含特定字符或连续重复字符等，请确保您的密码符合所有规定。 2. 密码重置：如果尝试多次后仍然无法注册，尝试使用“忘记密码”或“重置密码”的选项。通过输入您的注册邮箱或用户名，系统将向您发送重置密码的链接或说明，您可以通过该链接设置新

3 回答2271 围观

问文章中如何体现文章相关的研究项目？

loveliufudan

在写文章时，如果您的研究与ChiCTR（中国临床试验注册中心）注册的研究项目相关，您可以在文章的方法或材料部分适当提及该注册项目，以确保研究的透明度和科学性。以下是几种常见的方式来体现ChiCTR注册项目：1. 在方法部分：您可以在描述研究设计和方法的部分提及ChiCTR注册项目的信息。例如，可以简要介绍研究的注册号码、注册时间和注册链接等。这样可以向读者展示您的研究在设计和执行过程中遵循了临床试

3 回答999 围观

问请问如何获得有活性的大肠杆菌OmpF呢

loveliufudan

可以考虑以下方法： 1. 细胞提取：从培养好的大肠杆菌中，可以使用细胞破碎技术（如超声波破碎、机械破碎等）将细胞膜破碎并提取外膜蛋白。这可以通过使用适当的细胞破碎缓冲液和条件来实现。 2. 膜片制备：利用超速离心等方法，将提取的细胞膜分离出来。然后可以将细胞膜进行溶解、重悬，形成膜片。 3. 膜片活性检测：使用合适的实验方法（如电生理技术或荧光染色）对膜片的活性进行检测，以确定其中是否含有活性的O

3 回答777 围观

问HFD联合多次小剂量STZ腹腔注射造模二型糖尿病，不成功怎么补注射？

loveliufudan

可以考虑以下几点： 1. 确认注射剂量和方法：确保使用的STZ剂量准确，并检查腹腔注射的方法是否正确。如果注射剂量和方法都正确，可能需要重新评估该模型的适用性。 2. 考虑增加剂量：如果血糖未达到预期水平，可以考虑增加STZ的剂量，但需要谨慎操作。剂量增加应该根据实验室经验、文献报道和动物伦理规定进行决定，并且需要密切监测小鼠的整体健康状况和血糖水平。 3. 考虑增加注射次数：如果单次注射未能诱导

3 回答2235 围观

问蛋白质提取率计算，关于总蛋白和提取液蛋白含量的测定方法？

sswei

考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；其结合物在室温下1h内保持稳定。反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定

2 回答1957 围观

问如何验证蛋白分泌出细胞并结合在膜上

loveliufudan

要证明目的蛋白已经分泌到真菌细胞外，您可以尝试以下方法： 1. 细胞培养上清液检测：收集培养基中的上清液，通过蛋白质浓度测定、Western blot或ELISA等方法检测目的蛋白的存在。如果目的蛋白在上清液中可检测到，说明它已经被分泌到细胞外。 2. 免疫荧光染色：对真菌进行固定和免疫染色，使用抗体特异性地与目的蛋白结合，并通过荧光显微镜观察荧光信号。如果荧光信号在细胞外被观察到，可以确认目的蛋

2 回答3201 围观

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