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实验问答

31,551,162 科研人在看

问怎么样能使人间充质干细胞生长加快？

sswei

α‑雪松烯和异雪松酮可以有效促进人骨髓间充质干细胞的增殖,且不会影响其多向分化能力。

3 回答535 围观

问用pet32a载体表达的蛋白如何用肠激酶处理？

idiotOC0P

最近正好在做这个，我用的酶说明书是这样的体系

3 回答2308 围观

问GraphPadprism计算IC50后，从哪里可以看到标准偏差。或者抗肿瘤活性做完Ic50了。那个文献里面的±标准偏差是怎么算。

土井挞克树

1、打开GraphPadPrism5．0软件，点击column．2、然后点击create3、在title输入组别，在Y下面输入实验数据4、点击左侧graphs底下的data15、点击analyze6、选择columnstastics点击OK，弹出如下界面这个界面就有标准偏差了

3 回答12801 围观

问DNA斑点杂交加底物溶液为什么30min内甚至7小时都无斑点？是静止孵育吗

土井挞克树

可能是阻断封闭不足，建议将经过杂交和严格清洗后的膜用马来酸缓冲液漂洗1~5min；将膜在l00ul阻断液中孵育30min。

2 回答629 围观

问很多中药单体用于细胞实验的时候不都是用DMSO溶解，配母液。为啥有部分人说DMSO注射老鼠腹腔就有毒？会死。谢谢，急～

loveliufudan

在动物实验中，如果高浓度的DMSO直接注射到动物的腹腔，可能导致毒性反应，包括器官损伤、炎症反应和死亡。这是因为直接注射高浓度的DMSO可能对动物体内的生理过程产生不利影响。在细胞实验中使用DMSO溶解化合物时，一般会进行适当的稀释，以确保添加到细胞中的DMSO浓度在可接受范围内，通常是在0.1%至1%之间。这个浓度范围被认为是相对安全的，并且对大多数细胞类型没有显著的毒性作用。

3 回答4142 围观

问海参提蛋白前脱色脱脂方法

sswei

传统脱色方法包括活性炭吸附法等，但是这些方法损失率高，利用膜分离法脱色则会克服传统脱色方法缺点。

3 回答1662 围观

问pcr不起峰是什么原因

loveliufudan

PCR不出现特定的放大产物峰可能由以下原因引起： 1. 引物问题：引物是PCR反应中的关键组成部分。如果引物设计不当，可能会导致PCR不起峰或产物低效。检查引物序列是否正确，长度是否合适，是否存在互补、自身二聚等问题。 2. DNA模板问题：DNA模板可能存在质量问题，如降解、含有PCR抑制物质或浓度过低。检查DNA提取过程、保存条件和质量，确保模板DNA的质量良好且浓度适宜。 3. PCR条件问

3 回答1851 围观

问这个bw 是什么意思

土井挞克树

图中的bw是体重的意思。每日50mg/kg bw

3 回答3229 围观

问为什么MCF-7贴壁细胞，在25cm㎡培养瓶中，显微镜下观察有的地方能看清，有的地方看不清呢？而且长得很慢。

LXKathy

我感觉是不是培养皿折射率的问题？或者培养瓶放平了吗？

3 回答761 围观

问MCF-7细胞传了四代，还是很慢很慢是为什么呢，正常这个细胞应该一天一传才对，可是放在小培养瓶里四天都长不满。

loveliufudan

如果你的MCF-7细胞在经过四代传代后仍然生长缓慢，可能有以下几个原因导致： 1. 细胞老化：细胞在不断传代过程中会经历老化现象，细胞增殖能力可能会降低。这可能导致细胞生长速度减缓或停滞。 2. 培养条件不适合：MCF-7细胞对培养条件比较敏感，需要适宜的培养基、适当的温度和CO2浓度等。如果培养条件不符合细胞的需求，细胞的生长速度可能会受到影响。 3. 感染或污染：细胞培养过程中，可能会出现细菌

3 回答1388 围观

问姐妹们求救🆘 细胞迁移实验新手小白在线请教我们想做巨噬细胞给药预处理在诱导炎症在哪个步骤后划痕呢还是把处理后的细胞重悬

dxy_mqg1dtg8

在诱导炎症的实验中，通常在将巨噬细胞处理后，再进行划痕或其他诱导炎症的操作，以观察药物或预处理的效果。因此，在诱导炎症之前，应该先将巨噬细胞进行预处理，然后将处理后的细胞重悬，进行后续的实验操作。处理后的细胞可以在适当的时间点进行划痕或其他诱导炎症的实验操作，观察预处理的效果。

3 回答611 围观

问求问双倒数法测酶活计算步骤？

土井挞克树

双倒数作图法(double reciprocal plot),又称为林-贝氏(Lineweaver- Burk)作图法 1.Vmax[S] Km+[S] 两边同取倒数 2.Km 1/V= + 1/Vmax 1/[S] Vmax (林-贝氏方程) 3.V= 1/V 1/Vmax -1/Km 1/[S] 以“1/v”对“1/[s]”作图,直线与x 轴交点即为-1/Km。4.代入回归方程求得酶活曲线

2 回答3487 围观

问求教，我跑的qpcr，同一组引物却有不同的Tm值，可能是什么原因？

土井挞克树

可能是计算方法不同，Tm值相差太大可以进行Touchdown摸索最佳的反应温度。

3 回答4437 围观

问实验小白，请问如何获取要培养的细胞（例如：单个核细胞；cd14+单核细胞）原代或细胞系的培养基信息，需要添加的细胞因子等信息？

天南9HRM

3 回答423 围观

问基因的扩增，总是跑不出来，是什么原因呢？

土井挞克树

扩增失败，大概率是引物的原因。建议：拿到新引物后应从 Tm- 5℃ 寻找其适宜的扩增温度，在某温度起为特异性扩增。然后，在特异性扩增的温度下检测扩增效率：将 cDNA 梯度稀释（一般为 2×），测试稀释后的样本 Ct 值差异是否为 1 左右。1、若差值为 1，则扩增效率良好，可进行正式实验。2、若在特异性扩增的温度范围内不能使 Ct 值差异为 1，则需考虑重新设计引物

4 回答2451 围观

问细胞实验中如何确定抑制剂和激动剂浓度？和IC50有关系吗？

feixue7758527w

抑制剂和激动剂浓度还是要根据文献进行选择的，如果没有相关文献，只能自己从中间浓度慢慢摸索的。IC50也是建议从5倍开始摸索。

3 回答2518 围观

问关于实验中高、中、低剂量分组时，数据的差异

loveliufudan

在动物或细胞实验中，出现不一致或混乱的结果可能是由于多种因素造成的。以下是一些可能的解释： 1. 剂量响应曲线的非线性：某些药物或化合物可能会表现出非线性的剂量-效应关系，即不同剂量下的效果可能不同。这可能是由于药物的机制复杂性或细胞的生理反应的非线性性质引起的。 2. 细胞或动物个体差异：个体之间的差异可能导致对剂量的响应不同。在相同剂量下，某些个体可能对药物更敏感，而其他个体可能对药物反应较弱

3 回答4472 围观

问为什么我用再障患者骨髓血提的原代细胞长势很差？

dxy_mqg1dtg8

在再障患者的骨髓中，正常造血细胞的数量会明显减少，而癌细胞的数量则会增加。因此，再障患者的骨髓中的原代细胞生长受到了癌细胞的影响，其生长势可能会受到抑制，从而导致生长势较差。此外，再障患者的骨髓环境可能也发生了改变，造成细胞生长环境的不适宜，也可能会影响原代细胞的生长势。如果您在进行实验中发现再障患者骨髓血提的原代细胞长势很差，可以尝试以下措施来改善细胞生长情况：1. 改变培养基组成，尝试不同的培

4 回答458 围观

问请帮忙讲解一下AAV DNA的滚环复制，单链是如何成双链的？

loveliufudan

滚环复制的基本过程： 1. 感染宿主细胞：AAV进入宿主细胞后，其单链DNA基因组会被宿主细胞核内的转录因子进行转录，形成mRNA。 2. 产生复制起始位点：转录过程中，AAV基因组的一个特殊区域，即基因组复制起始位点（replication origin），会形成一个短暂的双链DNA结构。 3. 倒转与剪切：复制起始位点的双链DNA结构会通过酶切和倒转的过程，将一个链剪切出来并倒转。 4. 合成

3 回答1575 围观

问国产荧光微球标记抗体稳定性下降

dxy_mqg1dtg8

荧光微球标记稳定性下降可能有以下几个原因：1. 微球质量差：国产微球的质量可能不如进口微球，导致微球的表面粗糙度不一，比表面积不同，固相效果差，导致标记的蛋白易于脱落。2. 微球与蛋白的比例不合适：微球与蛋白的比例不合适可能会导致蛋白在微球表面的分布不均匀，部分蛋白可能会溶解或脱落，导致标记的稳定性降低。3. 固相方法不当：固相方法可能不够完美，导致蛋白没有均匀地附着在微球表面上，或者蛋白分布不均

1 回答1280 围观

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