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        如何提高病毒对细胞的感染效率?

        相关实验:慢病毒包装实验

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        93zlah8

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        3 个回答

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        dxyc42u

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        可以采用半液感染法提高感染效率

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        huarenqiang5

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        1.建议提前一天将细胞种植在24孔板中,以感染时细胞融合度在50%左右为宜。

        2.适当减少感染时的细胞培养基量可以增加感染效率,但也可能增加细胞毒性。如出现细胞毒性可增加培养基量或更换培养基。



        user-title

        93zlah8

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        病毒对细胞的感染效率受多个因素影响,如病毒活性、细胞自身的状态、MOI值、感染时间等。

        ①病毒活性:解冻病毒一定要在冰上进行,尽量避免反复冻融。-80 ℃保存半年以上需要重新测滴度。

        ②目的细胞:先进行预实验测试,看病毒载体是否合适感染目的细胞。对于悬浮细胞,可采用平角离心感染的方法,减少病毒感染时的体积,从而提升感染的效率。

        ③MOI值:进行MOI梯度摸索实验,找出最优的MOI值。

        ④感染时间:太早换液会导致感染效率下降;换液太晚,则对细胞的损伤较大。若细胞状态比较好,可适当延长换液时间来进一步提高感染效率。

        ⑤助转剂:可根据情况添加一定浓度的polybrene,不同细胞对polybrene的敏感性不同,可以用1-10 μg/mL 的范围筛选合适浓度,以24 h内细胞无明显毒性反应为佳。

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