为什么MCF-7贴壁细胞，在25cm㎡培养瓶中，显微镜下观察有的地方能看清，有的地方看不清呢？而且长得很慢。

我感觉是不是培养皿折射率的问题？或者培养瓶放平了吗？

造成细胞生长缓慢的主要原因及解决方法：

　　1，新配置的培养基以及换了新的血清，细胞不适应;

解决方法：最好使用最适宜的培养基，如果条件不允许，可以换液时不要全量换液逐渐增加新的培养基比例，1/4、1/2、3/4到1，多传代几次，让细胞慢慢适应。

　　2，细胞密度不够

　　有些细胞是细胞依赖性细胞，密度过低生长缓慢;也可能是细胞分泌促生长活性物质过少，细胞连接不好等原因。

解决办法：增加细胞接种密度;将细胞从大皿转移至小皿培养;适当增加培养基血清浓度。

　　3，培养环境改变

　　细胞培养箱的温度、CO2、细胞的生存环境要适宜，一般来说最佳温度:是37 ℃， CO2:浓度为5% ， pH:为7.2-7.4，还有渗透压等，大家要注意调好，不要随意改变。

　　4，污染，如支原体，细菌，真菌等

解决办法：细胞污染是多方面的原因，一方面要严格无菌操作技术、保持清洁的环境，另一方面，污染之后要及时鉴别和处理，并且，建议大家使用品质良好的细胞株和培养基，这是是减少污染的最好方法。

　　5，细胞本身状态改变，如衰老等

解决办法：没有可逆的办法，只能及时更换新的细胞。

可能是由于以下几个因素导致的：

1. 细胞密度不均匀：细胞在培养瓶中可能会形成聚集或斑块，导致有些地方细胞密度较高，有些地方细胞密度较低。高密度区域下的细胞可能更紧凑，观察时更容易看清。

2. 细胞附着情况：MCF-7细胞是一种贴壁细胞，它们需要附着在培养瓶底部才能生长。在培养过程中，有些区域的细胞可能更好地附着在瓶底，生长得更好，因此在显微镜下观察时更清晰。而有些区域的细胞可能附着较差，生长较慢，因此观察时难以看清。

3. 培养条件差异：培养细胞时，不同区域可能存在微小的温度、pH或营养物浓度差异，这可能对细胞的生长和形态有影响。这些微小的差异可能导致细胞在不同区域的生长速度和形态出现差异。

至于MCF-7细胞生长较慢的问题，MCF-7细胞是一种乳腺癌细胞系，其生长速度可能受到多种因素的影响，包括培养条件、细胞密度、营养供应和细胞状态等。如果您觉得细胞生长速度过慢，可以尝试调整培养条件，例如提供更适宜的培养基和培养温度，以及增加营养物浓度等，来促进细胞的生长。