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        求助THP1用PMA诱导M0

        相关实验:IPTG 诱导蛋白表达实验

        user-title

        迷茫医学森

        THP1用100ng/ml的PMA诱导成M0,24h看飘着很多,贴壁的状态感觉也不太行,没换液继续培养到48h,感觉比24飘的更多,状态更差了,PMA对THP1有毒性吗图片描述图片描述

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        3 个回答

        user-title

        dxyc42u

        有帮助

        跟诱导前细胞状态有很大关系,建议用状态好的细胞诱导

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        有毒性作用的,降低THP1浓度和诱导时间

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        PMA(Phorbol 12-Myristate 13-Acetate)是一种常用的诱导剂,用于将THP-1细胞从静止状态(M0)诱导为活化状态。然而,PMA的使用需要注意其剂量和作用时间,以避免对细胞产生毒性影响。

        1. PMA的浓度和作用时间:

        - 你提到使用了100ng/ml的PMA诱导THP-1细胞。这是一个常见的浓度范围,但也可能对THP-1细胞产生一定的毒性作用。你可以尝试减少PMA的浓度,如50ng/ml或更低的浓度,以降低其对细胞的毒性。

        - 此外,PMA的作用时间也需要注意。通常情况下,将THP-1细胞用PMA处理24小时足以诱导它们进入M0活化状态。将其继续培养到48小时可能导致细胞过度激活和细胞毒性的增加。

        2. 细胞状态和培养条件:

        - THP-1细胞在静止状态(M0)时通常是以悬浮状态存在的。在PMA诱导后,它们会附着于培养皿表面,并进一步分化为巨噬细胞。这种贴壁状态的转变通常是预期的。

        - 如果你观察到大量的细胞漂浮和状态较差,可能是由于PMA的过度刺激或细胞培养条件的问题。确保培养基的配方和PH值正确,并提供足够的营养物质和适当的培养温度和二氧化碳浓度。

        3. 细胞处理和观察:

        - 在PMA诱导期间,避免频繁的培养基更换,因为这可能会干扰细胞的附着和分化过程。可以在诱导后的适当时间点进行细胞处理和观察。

        - 如果细胞的状态仍然不理想,可能需要重新评估PMA的使用条件或尝试其他差异化剂。

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