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        求解答,加入IPTG诱导后,细菌增长十分缓慢怎么回事

        相关实验:IPTG 诱导蛋白表达实验

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        全是破绽

        先过夜摇菌,然后第二天将菌液按1:50接种到培养基里,摇菌2小时后,加入0.9mM的IPTG。加入iptg后细菌增长就十分缓慢了,5个小时后OD600值只翻了一倍。

        前面做过一次50ml的中试,在od600为0.28时诱导(约2-3小时),大概6个小时后od600涨到0.9左右。收菌50ml收了湿重0.8g

        把中试的菌保了菌,储存在20%甘油中,现在放大到1L,同样在od600为0.28时诱导(约2-3h),6个小时后,od值只增长到0.4-0.5左右,收菌1L收了湿重4g左右

        有没有人可以帮忙分析一下是什么原因。

        求问:为何加入iptg后细菌生长十分缓慢,如果是iptg抑制细菌生长的话,为何50ml中试时没有发生这个状况

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        3 个回答

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        考虑是你加的IPTG浓度过高所导致的。

        user-title

        sswei

        有帮助

        IPTG虽然能诱导蛋白表达,但对菌体有一定毒性,最佳使用浓度在0.3~0.5mM,而且是在接种1~2小时后加入为好。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        iptg具体细菌毒性,浓度太高会影响细菌增长

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