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        诱导蛋白表达实验中,蛋白表达是包涵体怎么办?如何调整诱导过程?

        相关实验:IPTG 诱导蛋白表达实验

        最新修订时间:

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        合作专家 | 吴宇晨硕士

        生物学 厦门大学

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        审核专家 | 聂壹峰博士

        纳米生物医学 中国科学院大学

        材料与仪器

        诱导剂、甘油

        步骤

        包涵体成因是蛋白表达过快,局部浓度过高,具有相互作用的蛋白聚合沉淀。因此避免包涵体方法如下:

        1、降低诱导温度温度,延长诱导时间(如 16 ℃,16 h);

        2、减少诱导剂浓度(0.01–0.1mM);

        3、在蛋白前融合进 MBP、TRX 等促溶标签;

        4、更换弱启动子;

        5、适当增加盐浓度,在蛋白溶剂中加入 10% 左右的甘油;

        6、改变诱导剂的类型和浓度:适当调整诱导剂的类型和浓度,如改变 IPTG 浓度、试验不同诱导剂(例如 L-arabinose)或尝试直接添加氮源/碳源;

        7、优化培养条件:例如培养温度、培养基配方、培养时间等。

        来源:丁香实验

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