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        关于RAW264.7细胞一氧化氮检测的问题

        相关实验:IPTG 诱导蛋白表达实验

        user-title

        dxy_5lnpwrmw

        用lps诱导后NO大概在30μM左右,但是control组和给药组NO一点都测不出来,全是0,请问是什么情况?我后面调整了给药时间(24h→48h),以及细胞浓度(10w/ml→100w/ml)都测不出来,请问有人可以指导一下吗?

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        1 个回答

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        一氧化氮(NO)在细胞中的产生通常是通过一氧化氮合酶(NOS)的催化反应完成的。在RAW264.7细胞中,诱导NOS的剂量和时间是关键因素,过低或过高的剂量或时间都可能导致NO测不出来的问题。

        另外,如果您使用的是颜色反应法或化学发光法等方法来检测NO,需要注意的是这些方法对样品中NO的灵敏度和特异性都有一定的要求。例如,颜色反应法中,如果存在其他氧化物质或化学物质可以干扰反应体系,则可能导致NO无法被检测到。

        您可以尝试进行以下优化:

        调整诱导剂量和时间:根据您的实验情况,尝试调整Ips诱导剂量和时间,选择适合的条件以提高NO的产生率。

        尝试使用其他方法:如果您使用的方法无法检测到NO,请尝试使用其他方法。例如,可以使用电化学法、荧光法等方法来检测NO。

        注意实验操作:在进行实验过程中,注意控制实验条件,避免其他物质的干扰。例如,注意细胞的密度和培养时间,以及使用纯净的试剂等。


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